Аннотация:Многие мышечные патологии такие как опухолевая кахексия, миопатия
Дюшена и др. сопряжены с окислительным стрессом и повышением уровня
воспалительных цитокинов, в том числе Фактора Некроза Опухоли (TNF).
Избыточное количество TNF вызывает истощение мышечных волокон, а
также нарушает миогенную дифференцировку - процесс формирования и
репарации скелетных мышц. Было показано, что активные формы кислорода
(АФК), в том числе продуцируемые митохондриями (мито-АФК) могут играть
важную роль в нарушении дифференцировки под действием TNF, однако
механизм этого процесса недостаточно изучен. Также было показано, что
ограниченное повышение АФК необходимо для регуляции миогенеза в
норме, в том числе в качестве сигнальных молекул, активирующих
аутофагию и митофагию. Аутофагия (и митофагия) является важным
механизмом ремоделирования клеточных органелл во время
дифференцировки миобластов, а ее недостаточность или избыточность
приводит к подавлению миогенеза. Мы предположили, что подавление
миогенеза под действием TNF может быть связано с мито-АФК-зависимым
нарушением регуляции митофагии. Для проверки этого предположения ранее
мы подобрали условия, в которых TNF подавляет миогенную
дифференцировку человеческих миобластов МВ-135.
В рамках данной курсовой работы были поставлены задачи:
1. Проверить действие классических и митохондриально-направленных
антиоксидантов в подобранных нами условиях
2. Оценить степень окисления липидов внутренней мембраны
митохондрий миобластов по мере увеличения конфлюэнтности клеток
и активации дифференцировки. Также изучить влияние антиоксидантов
на окисление липидов внутренней мембраны митохондрий в процессе
дифференцировки в норме и при ее нарушении, вызванном TNF.
3. Оценить влияние активаторов и ингибиторов аутофагии на протекание
миогенеза в норме и после обработки клеток TNF.
4. Оценить изменения уровня митофагии при активации
дифференцировки в норме, а также при ее нарушении, вызванном TNF
и влияние митохондриально-направленного антиоксиданта на уровень
митофагии в процессе дифференцировки, нарушенной TNF.