|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Влияние гликирования белков на белок-полиэлектролитное взаимодействиекурсовая работа (Специалист)
- Научный руководитель: Семенюк П.И.
- Автор: Софронова А.А.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Отдел биохимии животной клетки
- Год защиты: 2017
- Курс: 4
- Аннотация: Гликирование – неферментативная реакция между восстанавливающими углеводами и белками, усиливающаяся при повышении концентрации глюкозы в крови больных диабетом. При гликировании модифицируются аминогруппы боковых цепей аргинина и лизина, N-концевая аминогруппа белка, а так же тиоловые группы цистеина. Поскольку эти остатки играют ключевую роль в электростатическом взаимодействии с другими белками, нуклеиновыми кислотами и другими природными заряженными молекулами, мы исследовали влияние гликирования на взаимодействие белка с модельными полиэлектролитами разных типов. В качестве модельного белка был взят неструктурированный белок β-казеин, модификацию проводили в присутствии метилглиоксаля. Было изучено взаимодействие нативного и гликированного казеина с 6 различными полиэлектролитами – поликатионом поли-N-этил-4-винилпиридинием и полианионами гепарином, полицитозином, поли(стирол)сульфонатом (ПСС), полиметакриловой и полиакриловой кислотами. Был измерен размер нативного и модифицированного казеина, а так же комплексов с полиэлектролитами при разных температурах методом динамического лазерного светорассеяния. Казеин в зависимости от температуры находится в мономерной или мицелярной форме. Мономер нативного казеина способен связаться только с гепарином и ПСС, мицеллы казеина связываются только с гепарином. Гликированный казеин образует крупные агрегаты, но связывание белка с некоторыми полиэлектролитами приводит к комплексам, соизмеримым по размеру с мономером белка. С помощью изотермической титрационной калориметрии было показано, что нативный белок связывается с полиэлектролитами значительно активнее, чем гликированный, причем мицеллярная форма казеина взаимодействует сильнее мономерной. Согласно данным кругового дихроизма взаимодействие с полиэлектролитами не влияет на вторичную структуру казеина. Кроме того, было изучено влияние модельных полиэлектролитов на взаимодействие казеина с другими белками. Известно, что гликированный казеин вызывает агрегацию денатурированной ГАФД, а немодифицированный агрегацию не вызывает. При добавлении полиэлектролитов к ГАФД вызванная гликированным казеином агрегация практически полностью подавлялась. Было исследовано влияние полимеров на протеолиз нативной и гликированной форм казеина. Оказалось, что добавление полиэлектролитов защищает белок от протеолиза. Полученные результаты вносят вклад в понимание механизмов взаимодействия гликированных белков с различными полиэлектролитами, в частности, нуклеиновыми кислотами.
- Добавил в систему: Софронова Алина Андреевна