|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
6-тиогуанин-содержащие ДНК-дуплексы как субстраты CG-узнающей ДНК-метилтрансферазы M.SssIкурсовая работа (Специалист)
- Научный руководитель: Кирсанова О.В.
- Автор: Лойко А.Г.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Кафедра химии природных соединений
- Год защиты: 2016
- Курс: 2
- Аннотация: Выделена СрG-узнающая ДНК-метилтрансфераза M.SssI в виде гексагистидинового производного.Определена концентрация фермента методом Бредфорда, которая составила около 9 мкМ. Всего из 1 л культуры E.coli получено 0.82 мг белка высокой степени чистоты (>95%). Исследована активность фермента по защите ДНК-фага λ от расщепления метилчувствительной ДНК-метилтрансферазой SssI. Cконструированы 30-звенные 6-тиогуанин-содержащие ДНК-дуплексы с двумя участками узнавания SssI, представляющие собой субстраты M.SssI. Обнаружили, что устойчивость 30-звенного ДНК-дуплекса с двумя CpG-участками узнавания M.SssI заметно снижается при замещении одного гуанина на 6-тиогуанин в сайте узнавания M.SssI. Последующее введение второго 6-тиогуанина почти не оказывает влияния на устойчивость дуплекса.
- Добавил в систему: Кирсанова Ольга Вячеславовна