|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Использование метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения каталитических параметров оксидазы D-аминокислот из дрожжей Trigonopsis variabilis в реакции окисления цефалоспорина Cкурсовая работа (Специалист)
- Научные руководители: Атрошенко Д.Л., Тишков В.И.
- Автор: Котова Е.Ю.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Кафедра химической энзимологии
- Год защиты: 2017
- Курс: 2
- Аннотация: В клетке любого живого организма протекают миллионы химических реакций. Каждая из них имеет большое значение, поэтому важно поддерживать скорость биологических процессов на высоком уровне. В этом и заключается основная роль ферментов – специфических природных катализаторов, обладающих такими достоинствами, как высокая каталитическая активность при умеренных температурах и давлении и селективность. Но, несмотря на эти преимущества перед химическими катализаторами, ферменты имеют ряд недостатков – низкая стабильность, высокая стоимость выделения и очистки, что ограничивает их использование в промышленности. Так как ферменты имеют белковую природу, они легко разрушаются под действием высоких и низких температур и в результате наличия в растворе сильных кислот и оснований, способных изменять их оптимальный pH, при котором у ферментов наблюдается наибольшая каталитическая активность. Учитывая все вышеперечисленные недостатки ферментов, возникает необходимость создания мутантных форм ферментов, обладающих повышенной по сравнению с природными аналогами стабильностью и улучшенными каталитическими свойствами. Для этих целей используют современные методы молекулярной биологии и генной инженерии. В нашей лаборатории проводятся систематические эксперименты по направленному мутагенезу оксидазы D аминокислот из дрожжей Trigonopsis variabilis (TvDAAO). Так, ранее в нашей лаборатории были получены мутантные формы фермента TvDAAO с заменами цистеина в 298-ом положении на глицин, изолейцин, глутамин и аспарагин. Наиболее крупномасштабным производством с использованием TvDAAO является процесс получения 7-аминоцефалоспорановой кислоты (7-АЦК) из цефалопорина C. 7-АЦК является исходным ядром для синтеза цефалоспоринов различных поколений. Целью данной работы является определение каталитических параметров мутантных форм фермента Сys298Gly, Сys298Ile, Сys298Gln, Сys298Asn в реакции окисления цефалоспорина С (CPC).
- Добавил в систему: Атрошенко Денис Леонидович