Аннотация:Целью данной работы являлась разработка экспресс-методик определения катехоламинов (дофамина, эпинефрина и норэпинефрина) в биологических жидкостях по флуоресценции их комплексов с европием и окситетрациклином в 96-луночном полистирольном планшете.
Разработана индикаторная система для определения катехоламинов (дофамина, эпинефрина, норэпинефрина) с регистрацией флуоресцентного сигнала в
96-луночном полистирольном планшете. Система основана на получении интенсивно флуоресцирующих производных аналитов по реакции комплексообразования их с ионом европия и окситетрациклином.
Выбраны условия регистрации флуоресцентного сигнала (λex = 416 нм,
λem = 617 нм) и условия проведения определения катехоламинов в планшете (концентрации компонентов системы (Eu3+ – 0.1 мМ, ОТЦ – 0.1 мМ), природа и рН буферного раствора (MOPS рН 7.5), природа и концентрация ПАВ
(ТВИН 80 – 10 мМ), время реакции (10 мин)).
В выбранных условиях разработаны флуоресцентные экспресс-методики определения дофамина, эпинефрина, норэпинефрина в полистирольном планшете по реакции комплексообразования их с ионом европия и окситетрациклином с ПО: 0.03, 0.02, 0.0002 нМ соответственно;
sr разработанных методик не превышает 1%.
Продемонстрирована принципиальная возможность определения катехоламинов и их метаболитов в биологических жидкостях. Разработанные методики были апробированы на примере определения норэпинефрина в плазме крови крыс
4 исследуемых групп: контрольная, иммобилизация 2 ч., водная депривация 48 ч. и водная депривация 48 ч. + иммобилизация 2 ч.