ИСТИНА

Митохондрии – это органеллы, обеспечивающие клетки энергией за счет окислительного фосфорилирования (Saraste, 1999). Митохондрии имеют собственную ДНК и обладают собственной системой биосинтеза белка. Однако большая часть митохондриальных белков закодирована в ядерном геноме и импортируется из цитоплазмы. Кроме того, для некоторых организмов структурные РНК, закодированные в ядре, также необходимы для функционирования митохондриальной системы биосинтеза белка. Механизм переноса тРНК через митохондриальные мембраны и специфичность этого процесса сильно варьируют от вида к виду. Так, например, у трипаносоматид в митохондрии импортируются все тРНК, а в митохондрии пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae только одна – одна из двух изоакцепторных лизиновых тРНК (Schneider and Marechal-Drouard, 2000). В митохондрии млекопитающих тРНК не импортируется, однако в эти органеллы проникают РНК, входящие в состав РНКазыР и MRP, а также 5S рРНК. Большая часть импортируемых в митохондрии тРНК необходима для обеспечения митохондриальной трансляции. А вот роль импортируемой в митохондрии дрожжей лизиновой тРНК остается неясна. Она не аминоацилируется митохондриальной лизил-тРНК-синтетазой, на основании чего было высказано предположение о том, что данная тРНК не принимает участия в митохондриальном биосинтезе белка (Martin et al.,1979). Кроме того, митохондрии содержат собственную митохондриальную лизиновую тРНК, способную узнавать оба лизиновых кодона ААА и AAG. Механизмы импорти белков в митохондрии достаточно подробно изучены, чего нельзя сказать о механизмах импорта в митохондрии тРНК. Исследование последних интересно не только с фундаментальной, но и с прикладной точки зрения. До сегодняшнего дня в мире не существует эффективной векторной системы для доставки генетического материала в митохондрии. Такую систему можно было бы использовать в генной терапии для лечения ряда заболеваний человека, обусловленных мутациями в генах митохондриальных тРНК. Феномен импорта тРНК в митохондрии представляет собой естественную систему адресной доставки. С этой точки зрения представляется особо интересным создание искусственной системы импорта тРНК в митохондрии человека, в норме не импортирующих тРНК. Целью данной работы было исследование механизма импорта тРНК в митохондрии дрожжей и создание искусственной системы направленного импорта тРНК в митохондрии человека. В ходе данной работы предполагалось выполнить следующие задачи: 1. Оценить влияние нуклеотидов антикодона на способность тРНК1 импортироваться в митохондрии. 2. Определить, способна ли импортируемая тРНК участвовать в митохондриальном биосинтезе белка. 3. Исследовать способность дрожжевых тРНК импортироваться в митохондрии человека