ИСТИНА

Сахарным диабетом в мире болеют более 300 миллионов человек, причём 10 – 15 % из них болеют страдают диабетом первого типа. Понятно, что пероральная доставка является наиболее естественным и удобным способом введения инсулина. Однако, несмотря на множество предложенных схем и даже наличия препаратов, проходящих различные фазы клинических испытаний, в настоящее время на рынке имеется лишь одна клиническая форма неинвазивного инсулина.Серьезным тормозом на пути создания лекарственных средств является крайне незначительная биодоступность белков, вводимых перорально, которая не превышает 1 – 2 %. Обусловлено это гидролизом белка при экстремальных значениях pH желудочного сока, расщеплением белка под действием протеолитических ферментов желудка и тонкого кишечника и, наконец, плохой проницаемостью мембран клеток кишечника для больших белковых молекул. Указанный недостаток делает особенно актуальной разработку пероральной системы доставки инсулина, обеспечивающей его относительно высокую биодоступность.Целью настоящей работы являлось получение полиэлектролитных микрочастиц, обеспечивающих повышенную биодоступность рекомбинантных инсулинов при пероральном применении. Для микрокапсулирования инсулина был выбран метод последовательной адсорбции биополиэлектролитов на микроагрегатах нерастворимого комплекса белок-полианион [Балабушевич Н.Г. и др., 2010, который не требует сложного аппаратурного оформления и осуществляется в мягких условиях, способствующих сохранению биологической активности белков. В работе были поставлены и решены следующие задачи: 1)Получить и охарактеризовать полиэлектролитные микрочастицы, содержащие рекомбинантные инсулины. 2)Исследовать свойства микрочастиц, обеспечивающие увеличение биодоступности инсулина при пероральном введении. 3)Включить в полиэлектролитные микрочастицы ингибиторы протеолитических ферментов для защиты микрокапсулированного инсулина от воздействия протеаз желудочно-кишечного тракта. 4)Оценить in vivo биологическое действие препарата микрокапсулированного инсулина. Впервые постадийной адсорбцией декстрансульфата и хитозана на микроагрегатах нерастворимого комплекса белок-декстрансульфат получены микрочастицы с рекомбинантными инсулинами человека, аспарт и лизпро. Изучено изменение связывания ионов кальция, рН-чувствительных и мукоадгезивных свойств у инсулин-содержащих полиэлектролитных микрочастиц при моделировании прохождения желудочно-кишечного тракта человека. Продемонстрировано совместное воздействие мультифункциональных полиэлектролитных микрочастиц, полученных четырьмя стадиями сорбции полиэлектролитов (последняя стадия сорбции хитозан) на основные факторы, повышающие биодоступность инсулина при пероральной доставке. Разработаны способы включения белковых ингибиторов протеаз в полиэлектролитные микрочастицы. Исследовано одновременное воздействие микрокапсулирования и введения белковых ингибиторов протеаз в низких дозах на предотвращение протеолиза рекомбинантных инсулинов