ИСТИНА

Цель диссертационного исследования. Исследовать индукцию противоопухолевой активности дендритных клеток и макрофагов с помощью агонистов TLR-рецепторов, а также определить молекулярные механизмы их активации и противоопухолевого действия. В рамках поставленной цели решались следующие задачи: 1. Определить способность активированных TLR-агонистами дендритных клеток и макрофагов осуществлять прямое противоопухолевое действие против клеточных линий различных опухолей. 2. На примере модели опухолевой линии рака молочной железы исследовать три возможных механизма супрессии опухоли, опосредованных: а) агонистами семейства TNF, б) синтезом интерферонов первого типа или в) продукцией активных радикалов азота. 3. Установить различие противоопухолевых свойств двух клеточных популяций дендритных клеток: CD11b+ CD11c+ I-A/EInt и CD11b+ CD11c+ I-A/Ehigh. 4. Изучить кинетику активации дендритных клеток и макрофагов при распознавании агонистов TLR4 с использованием методов математического моделирования. 5. Установить особенности кинетики активации внутриклеточного NF-κB сигнального каскада в нативных дендритных клетках и макрофагах. 6. Основываясь на точном знании механизмов активации, кинетики активации и механизмов противоопухолевого действия, провести иммунотерапию дендритными клетками злокачественного новообразования в экспериментальной модели у лабораторных мышей. Объектом исследования являются дендритные клетки и макрофаги мыши, дифференцированные из клеток костного мозга под действием фактора роста ГМ-КСФ. Предметом исследования является TLR-индуцированная активация прямых противоопухолевых свойств дендритных клеток и макрофагов. Положения, выносимые на защиту 1. Агонисты TLR4 активируют дендритные клетки, которые непосредственно убивают клетки опухоли молочной железы мыши 4T1 и ингибируют их пролиферацию используя два механизма – секреция интерферона-бета, а также синтез пероксинитритов. Две различные субпопуляции дендритных клеток: I-A/EInt и I-A/Ehigh используют разные цитотоксические механизмы. 2. Показано, что нативные (первичные, нетрансформированные) макрофаги поддерживают пред-активированное состояние сигнального каскада NF-κB, что приводит к повышенному базальному уровню NF-κB в ядрах первичных макрофагов. Этот механизм повышает чувствительность нативных макрофагов к малым концентрациям агониста TLR4 и увеличивает скорость реакции ответа на агонист TLR и, следовательно, на инфекцию. 3. Иммунотерапия опухоли методом трансплантации TLR4-активированных дендритных клеток в место хирургически резецированной первичной опухоли позволяет ликвидировать отдаленные метастазы и предотвратить рецидивный рост опухоли в модели аденокарциномы молочной железы у лабораторных мышей.