ИСТИНА

1. Получены иммунохимические реагенты (трейсеры, иммуногены и антисыворотки), необходимые для разработки гомогенного поляризационного флуороиммуноанализа фенобарбитала и барбамила в моче. Коньюгированные производные барбамила с бычьим сывороточным альбумином и флуоресцеином синтезированы впервые и защищены авторскими свидетельствами. 2. Проведены исследования различных комбинаций синтезированных трейсеров с антисыворотками к фенобарбиталу и барбамилу, имеющими разные сроки иммунизации. В результате этих исследований установлены наиболее оптимальные варианты для проведения ПФИА. 3. Изучено влияние величины разведения антисыворотки, концентрации раствора трейсера, состава и pН буфера на результаты количественного определения фенобарбитала и барбамила в моче. С учетом полученных данных выбраны наиболее подходящие условия для проведения анализа. 4. Разработаны высокочувствительные специфичные экспресс-методики ПФИА (время анализа 20-ти образцов - 15-18 мин), предназначенные для идентификации и количественного определения фенобарбитала и барбамила в моче. Нижний предел обнаружения фенобарбитала по данной методике составляет 90 нг/мл, а барбамила - 50 нг/мл. 5. Определены все основные аналитические характеристики разработанных методик: чувствительность, пороговая концентрация специфичность, точность (сходимость и воспроизводимость), достоверность. 6. Установлена высокая степень корреляции результатов разработанных ПФИА с результатами гомогенного иммуноферментного анализа и высокоэффективной жидкостной хроматографией (r = 0.98). 7. Исследовано выведение фенобарбитала и барбамила с мочей после однократного приема высшей разовой дозы соответствующего препарата. Найдены максимальные концентрации изучаемых веществ в моче и установлено время через которое эти концентрации достигаются. Определены периоды времени, в течение которых исследуемые соединения могут быть обнаружены в моче пациентов с помощью разработанных методик. 8. Изучена стабильность калибровочных зависимостей и установлены сроки годности разработанных тест-систем, при условии их хранения в холодильнике при температуре +4оС. 9. Предложенные методики апробированы на практике при проведении наркологических и химико-токсикологических исследований и утверждены МЗ СССР.