ИСТИНА

Диссертационная работа посвящена выяснению факторов, определяющих спектральные свойства, квантовый выход и молекулярную яркость флуоресценции димерных флуоресцентных белков iRFP713, iRFP682 и iRFP670, созданных на основе бактериальных фитохромов. Перспективность создания маркеров на основе бактериальных фитохромов обусловлена тем, что их использование возможность наблюдать процессы, происходящие в живом организме на глубине до 20 мм, где другие маркеры не работают. В работе впервые показано, что цистеиновый остаток в GAF домене белков iRFP682 и iRFP670 (Cys256) способен связывать BV ковалентно, выявлено аллостерическое влияние мономеров димерных белков iRFP713, iRFP682 и iRFP670. Впервые установлено, что причиной необратимости денатурации NIR FP является наличие BV, ковалентно связанного с полипептидной цепью белка, но не наличие узла в его структуре. Создана новая мутантная форма iRFP713/V256C, которая имеет наибольший квантовый выход, среди известных к настоящему времени маркеров.