ИСТИНА

Диссертационная работа посвящена актуальной проблеме - исследованию участия урокиназы (активатора плазминогена урокиназного типа, uPA – urokinase-type Plasminogen Activator) в процессах ремоделирования сосудов при различных типах поражения – при атеросклерозе, транслюминальной баллонной коронарной ангиопластике, механическом повреждении и снижении кровотока. Впервые было убедительно и с помощью разносторонних доказательств продемонстрировано, что урокиназа является одним из ключевых участников негативного (отрицательного) ремоделирования сосудов (т.е. приводящего к сужению просвета и ограничению кровотока). Экспрессия урокиназы была повышена в зонах атеросклеротического поражения сосудов человека, а увеличение ее концентрации в крови являлось независимым предиктором рестеноза у больных ИБС после проведенной ангиопластики. В моделях повреждения сосудов на крысах показано, что динамика изменений экспрессии урокиназы в сосудистой стенке коррелирует с динамикой изменений пролиферации клеток, вызывающих негативное ремоделирование. Также было установлено, что внесение в сосудистую стенку экзогенной урокиназы стимулирует такие реакции, как образование неоинтимы, миграция гладкомышечных клеток, накопление моноцитов/макрофагов, повышение экспрессии и активности матриксных металопротеиназ, усиление оксидативного стресса. Именно комплекс этих реакций и приводит в конечном итоге к сужению просвета поврежденного сосуда. Под действием урокиназы наблюдалось повышение уровня экспрессии провоспалительных генов и генов оксидативного стресса, указывая на важную роль этих процессов в реализации действия урокиназы в отношении отрицательного ремоделирования сосудов. Часть результатов по эффектам урокиназы, полученных в моделях на животных, была подтверждена в культуре фибробластов (стимуляция пролиферации и фенотипической трансформации, активация матриксных металлопротеиназ, активация окислительных реакций). Интересным и впервые продемонстрированным автором является тот факт, что участие урокиназы в ремоделировании сосудов было опосредовано, в первую очередь, ее протеолитической активностью, а не рецепторным взаимодействием с клетками сосудистой стенки. Вариант урокиназы с поврежденным рецепторным доменом действовал в моделях на животных так же, как и нативная молекула, а вот повреждение протеолитического домена, наоборот приводило к исчезновению соответствующих эффектов в сторону негативного ремоделирования. Еще один неожиданный и оригинальный результат работы – противоположное действие урокиназы и тканевого активтора плазминогена на процессы перестройки сосудов. В отличие от урокиназы, тканевой активатор плазминогена, обладающий сходной протеолитической активностью, не только не стимулировал реакции отрицательного ремоделирования, но даже оказывал противоположное влияние. Таким образом, работа убедительно показала, что урокиназа является многофункциональным белком, ключевым регулятором процессов перестройки сосудистой стенки. Действие урокиназы обусловлено ее стимулирующим влиянием на миграцию и деление клеток, фенотипическую модуляцию фибробластов, аккумуляцию моноцитов/макрофагов и образование АФК в стенке сосуда, а также активацию протеолитических каскадов и экспрессию белков, участвующих в развитии воспаления и оксидативного стресса в сосудистой стенке. Все эти процессы ведут к констриктивному ремоделированию артерий, что делает урокиназу перспективной мишенью для воздействий, направленных на профилактику рестенозов и предотвращение неблагоприятной структурной перестройки кровеносных сосудов.