![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Изобретение относится к области биотехнологии, генной инженерии, микробиологии. Предложен рекомбинантный белок TUL4spCBD, который состоит из белка TUL4 Francisella tularensis, Gly-Ser спейсера и целлюлозосвязывающего домена гена эндоглюканазы CelD из Anaerocellum thermophilum, обладает антигенными свойствами белка TUL4 и способностью самопроизвольно связываться с целлюлозосодержащими сорбентами. Описана рекомбинантная плазмидная ДНК pTUL4spCBD размером 4388 н.п., кодирующая рекомбинантный белок TUL4spCBD. Плазмида содержит: искусственный бактериальный оперон рекомбинантного белка TUL4spCBD, включающий промоторную область раннего промотора бактериофага Т5 (7-87 н.п.), ген рекомбинантного белка TUL4spCBD (115-1113 н.п.), терминатор транскрипции (1134-1230 н.п.); бактериальный оперон бета-лактамазы, определяющий устойчивость к ампицилину (4183-3323 н.п. комплементарной цепи); бактериальный участок инициации репликации типа ColE1, обеспечивающий репликацию плазмиды в штаммах E. coli (4388 н.п.). Предложены также штамм Escherichia coli M15 [pREP4, pTUL4spCBD], депонированный во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под номером В-8728, продуцент рекомбинантного белка TUL4spCBD и способ получения очищенного, сконцентрированного и иммобилизованного рекомбинантного белка TUL4spCBD из указанного штамма путем обработки целлюлозосодержащим сорбентом супернатанта гидролизата клеток Escherichia coli M15 [pREP4, pTUL4spCBD] обработки. Раскрыт способ получения специфических антител к белку pTUL4spCBD, предусматривающий иммунизацию животных иммобилизованным на целлюлозе рекомбинантным белком TUL4spCBD. Предложенное изобретение обеспечивает высокий уровень продукции рекомбинантного белка TUL4spCBD, упрощение процесса его очистки, концентрирования и иммобилизации белка на целлюлозосодержащем сорбенте, что достигается за счет введения в состав рекомбинантного белка TUL4spCBD целлюлозосвязывающего домена из эндоглюканазы CelD из Anaerocellum thermophilum.