ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
Изобретения касаются векторной конструкции, штамма Escherichia coli, включающего такую векторную конструкцию, и способа получения рекомбинантного анальгетического пептида РТ1. Векторная конструкция получена на основе вектора pTWIN1 и содержит ген химерного белка DnaB-PT1, который состоит из хитин-связывающего домена из Bacillus circulans, интеина DnaB из Synechocystis sp. и анальгетического пептида РТ1. Охарактеризованный способ получения включает проведение контролируемой экспрессии гена химерного белка DnaB-PT1 в составе охарактеризованной векторной конструкции в штамме-продуценте Е. coli ER2566 с использованием в качестве индуктора изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозида. Далее проводят лизис клеток, отделение растворимых компонентов, очистку химерного белка DnaB-PT1 с помощью аффинной хроматографии на хитиновом сорбенте, автокаталитическое расщепление химерного белка DnaB-PT1 и очистку пептида РТ1 с помощью обращенно-фазовой хроматографии. Представленная группа изобретений позволяет получить анальгетический пептид с высоким выходом для использования в медицинских целях.