ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
1. Способ количественного определения специфических иммуноглобулинов G к низкомолекулярным соединениям в сыворотке крови, включающий введение в исследуемую пробу сыворотки крови материала, содержащего тестируемое низкомолекулярное соединение, и определение в пробе содержания иммуноглобулинов G методом иммуноферментного анализа, отличающийся тем, что в качестве материала используют опытную и контрольную нитроцеллюлозную подложку, которые размещают в различных лунках микропланшеты и производят их подготовку, причем подготовку опытной подложки осуществляют путем последовательной сорбции на ней сывороточного человеческого альбумина и тестируемого низкомолекулярного соединения, а подготовку контрольной подложки осуществляют путем сорбции на ней сывороточного человеческого альбумина, далее производят инкубацию опытной и контрольной подложек исследуемой пробой сыворотки, затем после промывки подложек фосфатным буфером добавляют к ним в лунку конъюгированные с пероксидазой хрена моноклональных антител к Fc-фрагменту иммуноглобулина G человека, вновь производят промывку подложек фосфатным буфером и образовавшийся иммунохимический комплекс специфических иммуноглобулиновых G антител окрашивают добавлением хромогена и проявляют внесением стоп-реагента, затем удаляют из лунок микропланшеты отработанные подложки и регистрируют оптическую плотность в опытном и контрольном образцах, сопоставляют их с оптической плотностью стандартных образцов с известной концентрацией иммуноглобулина G, и по разности содержания иммуноглобулина G в опытном и контрольном образцах судят о количестве специфических к низкомолекулярному соединению иммуноглобулинов G в сыворотке крови пациента при выполнении одновременного условия превышения оптической плотности в опытном образце над оптической плотностью контрольного образца не менее, чем в 1,5 раза. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при использовании в качестве низкомолекулярного соединения соли металла, подготовку контрольной подложки осуществляют путем сорбции на ней сывороточного человеческого альбумина и раствора соли, не обладающей свойствами антигена и имеющей анион, сходный с анионом соли металла.