|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Изучение стабильности и шаперон-зависимого фолдинга спермоспецифических белковНИР
- Руководитель НИР: Шмальгаузен Е.В.
- Участники НИР: Куравский М.Л., Мараховская А.С., Позднякова Н.В., Эльдаров М.А.
- Подразделение: Отдел биохимии животной клетки
- Срок исполнения: 13 января 2014 г. - 31 декабря 2014 г.
- Номер договора (контракта, соглашения): 13-04-00823 А
- Номер ЦИТИС: 01201355558
- Тип: Фундаментальная
- Приоритетное направление научных исследований: Структура и функции биологических макромолекул и макромолекулярных комплексов. Биокатализ.
- ПН России: Науки о жизни
-
Ключевые слова:
глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, сворачивание белков (фолдинг), рекомбинантные белки, шапероны, стабильность белков, амилоидогенные структуры
- Добавил в систему: Шмальгаузен Елена Викторовна
Источник финансирования НИР
| грант РФФИ |
Этапы НИР
| # | Сроки | Название |
| 2 | 13 января 2014 г.-31 декабря 2014 г. | Изучение стабильности и шаперон-зависимого фолдинга спермоспецифических белков |
| Результаты этапа: Продолжено исследование структурных особенностей рекомбинантной спермоспецифичной глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (dN-GAPDS), обеспечивающих повышенную стабильность этой изоформы фермента по сравнению с соматической глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназой (GAPD). На данном этапе было получено три мутантных белка dN-GAPDS с заменами пролина на аланин (P164A, P197A, и P213A) и три мутантных белка с мутациями в области солевых мостиков, которые могут быть важны для стабильности (E96Q, D311N, E244Q). Выявлено два существенных для стабильности белка dN-GAPDS: остаток пролина P164 и остаток аспарагиновой кислоты D311, образующий солевой мостик с Н124. Остаток P164 вносит вклад в термостабильность dN-GAPDS: мутация P164A приводит к снижению параметра Тм на 3°С. Разрушение солевого мостика D311-H124 (мутация D311N) снижает стабильность активного центра dN-GAPDS в отношении GdnHCl, увеличивая скорость инактивации фермента в 6 раз по сравнению с белком дикого типа. При этом каталитическая активность фермента увеличивается в 2 раза без существенного влияния на термостабильность. Аминокислотные остатки P197 и P213 и солевой мостик E96-H394 оказывают небольшое стабилизирующее действие на dN-GAPDS. | ||
Прикрепленные к НИР результаты
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".