ИСТИНА

Данный проект позволит получить фундаментальные знания о формировании, развитии и функционировании предсердной перегородки млекопитающих. Практически не исследованы биоэлектрические свойства межпредсердной перегородки, в том числе остается неизученной способность межпредсердной перегородки к автоматической активности. Полученные данные о вегетативной регуляции перегородки, в том числе роль классических медиаторов парасимпатической и симпатической систем (а также комедиаторов симпатической системы-соединений пуринового ряда) в изменении биоэлектрической активности миокарда перегородки являются немаловажными в понимание фундаментальных процессов электрофизиологической составляющей работы сердца. Определение признаков эмбрионального фенотипа в ткани миокарда межпредсердной перегородки и детектирование потенциальной пролиферативной активности кардиомиоцитов перегородки имеют важнейшее прикладное значение. Данное исследование поможет подтвердить или опровергнуть гипотезу о наличии признаков эмбрионального фенотипа ткани перегородки. Результаты исследования потенциально могут внести существенный вклад в развитие клеточных технологий восстановительных процессов сердечной мышцы при различных повреждениях.

This project will provide fundamental knowledge about the formation, development and functioning of the interatrial septum in mammalian heart. The bioelectric properties of the interatrial septum have not been practically studied, the automaticity of the interatrial septum have not been explored yet. The obtained data of the vegetative regulation of the septum and role of classical mediators of the parasympathetic and sympathetic systems in changing the bioelectric activity of the myocardium are important in understanding the fundamental processes of the electrophysiological component of the heart. Determination of the signs of the embryonic phenotype in the myocardial tissue of the interatrial septum and detection of the potential proliferative activity of the cardiomyocytes of the septum are of great practical importance. This study will help to confirm or disprove the hypothesis of the presence of signs of an embryonic phenotype of the septal tissue. The results of the study can potentially make a significant contribution to the development of cellular technologies of cardiac muscle recovery processes with various damages

1. На первом этапе выполнения проекта (2018 год) будут получены данные о биоэлектрической активности в миокарде межпредсердной перегородки крысы. Будет проведена оценка параметров биоэлектрической активности (длительность потенциалов действия, уровень потенциала покоя). Будут получены результаты исследования биоэлектрической активности миокарда перегородки в покое (при отсутствии электростимуляции) и при ритмической стимуляции. Оценена способность миокарда перегородки к автоматии. Будет проведено сравнение параметров электрической активности в миокарде перегородки и рабочем миокарде ушка левого предсердия. 2. Будет проведена оценка уровня экспрессии гена Ki-67 в миокарде перегородке и проведено сравнение экспрессии гена Ki-67 в миокарде перегородки и рабочем миокарде левого предсердия. Будут сделаны предварительные выводы о пролиферативном уровне кардиомиоцитов перегородки. 3. Будут подобраны протоколы выделения и подготовки гистологических препаратов, подобраны первичные и вторичные антитела к коннексину Cх43, маркеру незрелых кардиомиоцитов GATA-4 и маркеру пролиферации Ki-67 для дальнейшего проведения иммуногистохимического окрашивания в миокарде перегородки и рабочем миокарде левого предсердия. 4. Будут подобраны протоколы выделения и подготовки гистологических препаратов для проведения идентификации пролиферирующих клеток миокарда перегородки путем введения аналога тимидина EdU и дальнейшей оценки флуоресценции в миокарде перегородки крысы.

Коллектив обладает опытом в проведении электрофизиологических экспериментов, что доказывают приведенные ниже публикации. Были проведены исследования в различных отделах сердца, в том числе предсердии и желудочке грызунов. Освоены и отработаны методы по регистрации и отведении потенциалов действия в покоящихся препаратах предсердия и желудочках мыши, крысы и морской свинки, а также в синоатриальном узле и волокнах Пуркинье кролика. Исследовали регуляцию вегетативной системы в сердце кролика, а также влияние пуриновых соединений, таких как аденозин, АТФ, НАД+ и диаденозиновые полифосфаты в сердце млекопитающих. Также освоены молекулярные и гистологические методы, что позволяет полноценно дополнять и систематически охарактеризовать результаты электрофизиологических исследований. Таким образом, членами коллектива полноценно освоен стандартный электрофизиологический микроэлектродный метод на объектах, весьма схожих с объектом настоящего проекта – предсердной перегородке. В связи с вышесказанным, приведены основные результаты, полученные членами научной группы и впервые опубликованные: Изучено влияние диаденозиновых полифосфатов (тетра- и пентафосфатов, далее Ар4А, Ар5А) и НАД+ на биоэлектрическую активность предсердного и желудочкового миокарда, миокарда межпредсердной перегородки и миокарда легочных вен сердца млекопитающих; Изучено влияние Ар4А, Ар5А и НАД+ на биоэлектрическую активность пейсмекера сердца (синоатриального узла крысы и морской свинки) и проводящей системы сердца (на примере волокон Пуркинье кролика); Сопоставлено влияние Ар4А, Ар5А и НАД+ на биоэлектрическую активность сердца с влиянием эндогенных агонистов Р1 и Р2-рецепторов - аденозина и АТФ (на примере предсердного миокарда крысы); Выяснены основные рецепторные механизмы действия Ар4А, Ар5А и НАД+ в сердце; Выявлено изменение динамики цитоплазматического кальция в кардиомиоцитах под влияние экзогенных Ap4A, Ap5A и НАД+;