Результаты этапа: В настоящей работе показано, что второй ТБ вируса зеленой пятнистости гибискуса (Hibiscus green spot virus) БТБ2, интегральный белок ЭПР, вызывает пережатия трубочек ЭПР, приводящее к снижению подвижности люминального содержимого, и имеет сродство к участкам мембран с высокой степенью искривления. Описанные свойства сходны с таковыми у ретикулонов, клеточных белков, вызывающих искривление мембран, что определяет формообразование трубочек ЭПР. Установлено, что, как и ретикулоны, БТБ2 обладает W-подобной топологией внутри мембран ЭПР. Показано, что БТБ2 транспортируется и накапливается в ПД, кардинально увеличивая их пропускную способность, и эта активность БТБ2 коррелирует с его способностью к пережатию трубочек ЭПР. Мы предполагаем, что индукция пережатий трубочек ЭПР способствует БТБ2-зависимому увеличению проницаемости ПД и формированию ПД-ассоциированных репликационных компартментов, следствием чего в конечном итоге является эффективный межклеточный транспорт вируса. Такой механизм ранее не был известен и не обсуждался. Более того, мы показали, что пережатие трубочек ЭПР также происходит в клетках, экспрессирующих ТБГ2 (второй ТБ Х вируса картофеля (ХВК)), а также в клетках, инфицированных ХВК и вирусом табачной мозаики (ВТМ). Это позволяет предположить, что ретикулон-подобные ТБ не являются уникальными для вируса зеленой пятнистости гибискуса и эксплуатируются разными РНК-вирусами. Французская изучила закономерности отложения каллозы в ПД в присутствии ТБ ВТМ и dsRNA. Также партнерами с использованием иммунопреципитации был выявлен ряд предполагаемых белков-мишеней, взаимодействуя с которыми ТБ ВТМ может влиять на отложение каллозы в ПД.
Поставленные задачи реализованы в полной мере, цели достигнуты. В ходе выполнения проекта опубликованы статьи, в том числе статья в высокорейтинговом журнале с импакт-фактором 10. |