| 1 |
1 июня 2015 г.-5 декабря 2015 г. |
Разработка методик выделения, культивирования и направленной дифференцировки МСК |
| Результаты этапа: Был разработан комплекс методик исследования МСК, включающий следующие методы: метод выделения МСК из костного мозга 3-дневных крыс линии Вистар; метод культивирования их в Среде ДМЕМ на культуральном пластике и контрольных биополимерных скэффолдах; метод остеонаправленной дифференцировки МСК с использованием специальных сред и остеогенных факторов (дексаметазона) (в качестве контроля был использован метод дифференцировки МСК в адипогенном направлении с использованием специальной среды); методы контроля роста МСК с использованием подсчета клеток под инвертированным световым микроскопом и калориметрического ХТТ-теста; метод флуоресцентной микроскопии для визуализации флуоресцентно-меченных клеток (например, окрашенных кальцеином для анализа дифференцировки МСК в остеогенном направлении); метод электронной сканирующей микроскопии для анализа роста и морфологии МСК; биохимические методы окрашивания на β-галактозидазу для анализа старения клеток и метод определения активности щелочной фосфатазы для анализа остеодифференцировки МСК; иммунохимическая методика фенотипирования МСК с использованием антител к поверхностным маркерам МСК крысы. Разработка этого комплекса методов была проведена с отработкой культивирования МСК на трехмерных пористых скэффолдах в сравнении с культивированием МСК в стандартных условиях на плоскости – на культуральном пластике. В качестве трехмерных пористых скэффолдов были использованы контрольные скэффолды из ПОБ, полученные по разработанной ранее методике. Эксперименты проводили в стерильных условиях. |
| 2 |
1 января 2016 г.-5 декабря 2016 г. |
Исследование физико-химических свойств, биодеградации in vitro и биосовместимости in vitro полученных биокомпозитных скэффолдов |
| Результаты этапа: |
| 3 |
6 декабря 2016 г.-5 декабря 2017 г. |
Исследование дифференцировки МСК на биокомпозитных скэффолдах in vitro |
| Результаты этапа: |
