ИСТИНА

В России огромные территории загрязнены нефтепродуктами, составляя около 72 млн. га, что соответствует 4 % от всей территории страны и соизмеримо с площадью современной Германии. На ликвидацию нефтяного загрязнения тратятся огромные средства. Ведущую роль в отчистке почвы от нефти играют различные биопрепараты, содержащие углеводородокисляющие бактерии. Основная проблема биопрепаратов – их нестабильность в окружающей среде. Эффективность применения нефтеразрушающих штаммов сильно варьирует от погодных условий, времени и состояния вносимой культуры. Для полной рекультивации необходимо многократное внесение биокультуры в дозах, превышающих предлагаемые разработчиками биопрепаратов. Из-за плохой приживаемости культур часто рекультивация территорий проходит не в один год, а в два и более лет. Для компаний, занимающихся рекультивацией данных земель, это серьезная экономическая нагрузка, и чтобы сократить данные издержки, мы предлагаем повысить стабильность биопрепаратов с помощью экологически безопасного метода – нанесения гуминовых кислот (ГК) на клетки нефтеокисляющих бактерий. Как правило, гуминовые препараты, внесенные в почву, тотально стимулируют почвенное микробное сообщество, в результате углеводородокисляющие бактерии плохо приживаются в почве. В нашем случае будет происходить адресная активация только тех штаммов, которые необходимы, в результате они будут лучше приживаться в почве, так как конкурентные организмы стимулироваться не будут. В качестве тест объекта нашим коллективом была использована культура Acinetobacter sp., выделенная из коммерческого препарата «Дестройл». Целью исследований является изучение интенсивности разрушения нефти в почве ассоциатами углеводородокисляющих бактериальных штаммов Acinetobacter sp. с ГК, сорбированной на поверхности клеток. Были поставлены следующие задачи: 1. Исследовать биологическую активность гуминовой кислоты по отношению Acinetobacter sp. 2. Построить изотермы сорбции ГК для культуры Acinetobacter sp. и провести расчет максимальной сорбции и коэффициента сродства 3. Определить оптимальную концентрацию ГК для проведения полевых исследований по разложению нефти ассоциатами бактерий с сорбированной ГК. 4. Заложить полевой эксперимент, в ходе которого в течение года будут отбираться почвенные образцы на анализ угеводородов и состояния микробного сообщества. 5. Методом газово-жидкостной хроматографии и методом ИК-спектрометрии проведена сравнительная характеристика деструкции отдельных фракций нефти в почве при различных способах рекультивации при внесении: удобрений, нативных микроорганизмов, микроорганизмов, обработанных гуминовыми кислотами, гуминовых кислот.

В лабораторных условиях исследована биологическая активность гуминовой кислоты (ГК) по отношению к нефтеразрушающему штамму Acinetobacter sp. Влияние ГК на бактерии оценивалось в двух формах - свободной растворенной и сорбированной на поверхности клеток. Установлено положительное стимулирующее влияние сорбированной формы ГК на Acinetobacter sp., которое превосходит действие ГК в растворе. В полевом эксперименте изучено влияние пленок гуминовых кислот на активность разрушения нефтепродуктов в почве. Выявлено, что после 12 месяцев инкубации нефти в почве в контрольном варианте (без всего) содержание нефтепродуктов уменьшилось на 17 %, в то время как при добавлении улучшенного биопрепарата (клетки+сорбированная ГК) уменьшение составило 24 % (показано методом ИК-спектрометрии). За 6 месяцев содержание алканов С13 – С33 упало на 14 % в контрольном варианте, в то время как в варианте улучшенного биопрепарата, содержание алканов снизилось на целых 22% (газово-жидкостная хроматография).