ИСТИНА

Иммунофлуоресцентным методом показано,что Topo IIα в митотических хромосомах культуры клеток HeLa -166 in situ распределяется равномерно по длине и толщине хроматид.Показано, что интерфазные ядра необработанных клеток окрашиваются антителами к Topo IIα не равномерно, а в виде скоплений, с ярким свечением в зоне околоядрышкового хроматина. В разных клетках интенсивность флуоресценции антител к ТороIIα в ядрах различается. С помощью антител к CENP A и Topo IIα было показано, что в клетках, ядра которых содержат по одному окрашенному центромерному участку на хромосоме, интенсивность свечения ТороIIα значительно ниже, чем в клетках, ядра которых содержат два окрашенных центромерных участка. Интенсивность свечения Topo IIα как в группе клеток с одним, так и с двумя выявленными центромерными участками имеют различия в интенсивности свечения антител Topo IIα в ядрах. Полученные данные показали, что в интерфазных ядрах культуры клеток HeLa -166 in situ в G1 и раннем S периоде Topo IIα значительно меньше, чем в позднем S и G2 периодах. В ядерном белковом матриксе этих клеток на фоне остаточного ядра отчетливо выявляются остаточные ядрышки,а на периферии ядра в районе ламины видны плотные гранулы.Также ТороIIα обнаруживается на периферии остаточных ядрышек, где до обработки нуклеазами находился околоядрышковый хроматин, входит в состав хромоцентров, внутренней белковой сети матрикса и содержится в гранулах около мембраны, в которых до обработки ДНКазой, вероятно, находились участки прикрепления хромосом к ламине. В разных клетках интенсивность флуоресценции антител к ТороII во внутренней белковой сети матрикса остаточных ядер различается. Topo IIα в обработанных 2М NaCl и нуклеазами митотических хромосомах распределяется не равномерно по длине хромосом, а в виде фрагментов или гранул разной степени яркости. Антителами к Topo IIα особенно ярко окрашивается прицентромерный хроматин.