| 1 |
15 января 2015 г.-31 декабря 2015 г. |
«Роль динамического взаимодействия микротрубочек с цитоскелетными и адгезивными структурами в защите и восстановлении барьерной функции эндотелиальных клеток» |
| Результаты этапа: Исследованы изменения цитоскелета эндотелиальных клеток от момента распластывания и образования первых межклеточных контактов до формирования конфлюэнтного монослоя. Показано, что (1) в клетках венозного эндотелия экспрессируются две основные немышечные изоформы актина — β- и γ-цитоплазматические актины; (2) структурно система актиновых филаментов организована в виде кортикальной сети актина и пучков актиновых стресс-фибрилл; (3) исследование системы актиновых филаментов с помощью мечения специфическими антителами показало, что кортикальная и ламеллярная сеть состоят из γ-актина, в то время как пучки актиновых стресс-фибрилл состоят из β-актина. Формирование эндотелиального монослоя сопровождалось изменениями в системе микротрубочек: их количество увеличивалось на краю клетки, причем количество микротрубочек в районе уже сформированных межклеточных контактов всегда было выше, чем в области свободной ламеллы клетки. |
| 2 |
1 января 2016 г.-31 декабря 2016 г. |
«Роль динамического взаимодействия микротрубочек с цитоскелетными и адгезивными структурами в защите и восстановлении барьерной функции эндотелиальных клеток» |
| Результаты этапа: В ходе выполнения работ в рамках 2 этапа (1) исследовали эффект нокаута альфа- и бета- изоформ актина на организацию и морфологию системы цитоплазматических микротрубочек; (2) провели эксперименты по изучению вовлеченности плюс-концевого белка EB1 во взаимодействие микротрубочек и актиновых структур клетки; (3) установили, что плюс-концевой белок микротрубочек EB1 взаимодействует преимущественно с гамма-актиновыми (но не бета-актиновыми) структурами клетки. Для регистрации изменений в организации системы цитоплазматических микротрубочек и актиновых структур клетки использованы как стандартные методы иммунофлуоресцентной микроскопии, так и флуоресцентная микроскопия с суперразрешением (SIM/STROM), а также иммуноэлектронная микроскопия.
|
| 3 |
1 января 2017 г.-31 декабря 2017 г. |
«Роль динамического взаимодействия микротрубочек с цитоскелетными и адгезивными структурами в защите и восстановлении барьерной функции эндотелиальных клеток» |
| Результаты этапа: В ходе выполнения работ в рамках 3 этапа исследовали связь между Tpm3.1-содержащими актиновыми филаментами и микротрубочками. Для исследования использованы как стандартные методы иммунофлуоресцентной микроскопии, так и флуоресцентная микроскопия с суперразрешением (SIM/STROM), а также электронная микроскопия.
|
