ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
Рецепторы в физиологическом и патофизиологическом действии пролактина на клетки печени и почки разного типа. Будет исследовано влияние пролактина in vivo на скорость желчетока в норме и при обструктивном холестазе у самцов и самок крысы в условиях блокады секреции пролактина агонистом Д2 рецепторов дофамина и гиперпролактинемии, вызванной пересадкой донорских гипофизов под почечную капсулу, а также действие пролактина на просвет желчных протоков in vitro. Сопоставление полученных результатов с изменениями экспрессии потенциальных мишеней пролактина в клетках печени и почки позволит оценить пути влияния пролактина на экзокринную функцию печени и экскреторную функцию почки. Анализ изоформного состава рецептора пролактина в клетках печени и почки крысы позволит оценить перспективы клинического применения блокаторов секреции и/или рецепции пролактина для лечения холестаза беременных и других системных заболеваний, сопровождающихся гиперпролактинемией. Половые гормоны, их рецепторы и ферменты метаболизма в стенке сосудов при атерогенезе. Будет проанализирована экспрессия рецепторов, ферментов обмена половых гормонов и ряда молекул клеточной адгезии во фрагментах крупных кровеносных сосудов мужчин и женщин разного возраста, включающих неповрежденную и затронутую атерогенезом ткань, полученную при аутопсии. Будет произведена оценка эффективности действия половых гормонов на пролиферацию и захват холестерина клетками, выделенными из указанных образцов ткани. Предполагается, что в результате удастся прояснить роль локально образующихся эстрогенов в защите сосудов женщин от развития атеросклероза. Взаимодействие 16α,17α-циклоалканопрогестеронов с рецептором прогестерона. Будет оценено сродство ряда модифицированных 16α,17α-циклоалканопрогестеронов к рецептору прогестерона матки, а также к пентаранофилинам матки и сыворотки крови. Ожидается, что в результате удастся получить дополнительные сведения об архитектуре лигандсвязывающего кармана рецептора и оценить роль дополнительных взаимодействий лигандов с белком в проявлении ими свойств частичных агонистов/антагонистов.
В настоящее время исследования ведутся по трем направлениям: регуляция пролактином экскреторной функции печени и почки; половые гормоны и атеросклероз; структурные детерминанты, конструирование и анализ действия избирательных аналогов прогестерона. На крысиной модели холестаза беременных исследуется влияние избытка пролактина на водно-солевой обмен и выведение из организма шлаков. Обнаружено, что пролактин оказывает натриуретическое действие за счет подавления реабсорбции натрия в почке. В клетках желчных протоков обнаружены корреляционные связи между экспрессией рецептора пролактина и транспортерами CFTR, mrp3 и mrp2, свидетельствующие о прямом действии гормона. Анализ содержания мРНК нескольких функциональных групп в интактной аорте и атеросклеротических повреждениях человека, а также в макрофагах человека позволил выявить несколько потенциальных объектов регуляторного действия женских половых гормонов, защищающих женщин от развития заболевания. Обнаружено отсутствие гомеостатической регуляции экспрессии ряда компонентов эндосом/лизосом, что может служить одной из причин патогенеза заболевания. На основе проведенного анализа детерминант лигандов, определяющих их взаимодействие с мембранным (альфа) и ядерным рецепторами прогестерона, синтезированы аналоги прогестерона, которые по предварительным данным обладают высокой избирательностью в отношении мембранных рецепторов гормона. Инициированы исследования по анализу биологических эффектов таких соединений.
МГУ им. М.В. Ломоносова | Соисполнитель |
МГУ им. М.В. Ломоносова | Соисполнитель |
госбюджет, раздел 0110 (для тем по госзаданию) |
# | Сроки | Название |
1 | 1 января 2014 г.-31 декабря 2014 г. | Гормонсвязывающие белки, гормональный ответ и дифференцировка клеток |
Результаты этапа: Определено влияние гиперпролактинемии на биодинамику желчных кислот и бикарбонатов в норме и при холестазе. Показано, что в модели холестаза беременных биодинамика желчных кислот не меняется, а биодинамика бикарбонатов изменяется в сторону увеличения экскреции бикарбонатов и снижения их концентрации в крови. Аналогичны изменения выявлены для ионов натрия. Установлено, что в модели холестаза беременных активность Na/K-АТФазы во внешнем мозговом слое почки также снижается. Отработан метод проверки соединений на агонистическую и антагонистическую активность в отношении ядерного рецептора с помощью определения бета-галактозидазной активности репортерного гена под контролем промотора с прогестерон-чувствительным элементом. Определена агонистическая активность 18 различных прогестинов в этой модельной дрожжевой системе. Освоен метод получения мононуклеарных клеток периферической крови, подобраны условия их культивирования, индукторы синтеза интерлейкинов, выбраны концентрации гормонов для инкубации с клетками. Начата работа по конструированию плазмидных векторов с генами мембранных PR для трансфекции в клетки человека на основе экспрессионной плазмиды pDual. Ряд клеточных линий опухолевых клеток человека проверен на наличие ядерных и трех типов мембранных рецепторов прогестерона методом ПЦР в реальном времени. Отобрана линия BxPC3 аденокарциномы поджелудочной железы, содержащая самое большое количество мембранных рецепторов прогестерона и не содержащая ядерных рецепторов. | ||
2 | 1 января 2015 г.-31 декабря 2015 г. | Гормонсвязывающие белки, гормональный ответ и дифференцировка клеток |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".