ИСТИНА

Фактор некроза опухолей (ФНО) – цитокин с множественными защитными, регуляторными и гомеостатическими функциями. С другой стороны, при сверхэкспрессии ФНО может индуцировать различные заболевания и патологические состояния, поэтому анти- цитокиновая терапия, нейтрализующая ФНО, нашла широкое применение при лечении ряда аутоиммунных болезней. Парадоксально, но в некоторых случаях, передача сигнала от ФНО через рецепторы ФНО in vivo способствует росту опухолей, что стало предпосылкой к рассмотрению возможности применения анти-цитокиновой терапии и в онкологии. Лаборатория китайского партнера недавно показала, что про-туморогенный эффект ФНО обусловлен передачей сигнала через вспомогательный рецептор ФНО (р75 или TNFR2) и опосредован супрессорными клетками миелоидного происхождения (CD11b+Gr1+ myeloidderived suppressor cells). В предлагаемом исследовании будет изучена возможность экспериментальной терапии перевиваемых опухолей на мышах различными блокаторами ФНО, применяемыми в клинике. Поскольку большинство этих лекарств неактивно в мышах, будут использованы недавно созданные уникальные мыши, которые продуцируют ФНО человека, и не продуцируют ФНО мыши (Kruglov et al, JCI under review). В предлагаемой кооперации будет так же исследован механизм действия ФНО через р75, способствующий росту опухолей.

В ходе работы были подобраны экспериментальные условия для индукции опухолевого роста и изучения развития MDSC у C57Bl/6 мышей с использованием перевиваемых опухолевых линий. Подкожное и внутрибрюшинное введение MCA 205 фибросаркомы и EL4 Т-клеточной лимфомы приводит к накоплению MDSC в крови до 40% и до 80%, соответственно. TNF является ключевым цитокином, обеспечивающим сигналы выживания и дифференцировки MDSC, а также важным фактором для поддержания функций этих клеток. Поэтому изучение влияния блокировки сигнального каскада, опосредуемого TNF, может иметь как клиническое значение, так и быть актуальным для изучения и понимания молекулярных механизмов регуляции MDSC. Для фармакологической блокировки TNF мыши применяли этанерцепт, который связывает и растворимую форму лимфотоксина, тем самым, системно ингибируя не только функции, опосредованные TNF, но и функции растворимого LTa. В качестве контроля применяли инфликсимаб, не связывающий TNF мыши, или PBS. В условиях системной анти-TNF/LТα терапии мы не обнаружили значимых различий в развитии EL4 Т-клеточной лимфомы. Важно отметить, что роль TNF впервые была показана для солидных опухолей, возможно, в случае с лимфомой, другие факторы, выделяемые микроокружением опухоли и опухолевыми клетками, индуцируют развитие и накопление MDSC и рост самих опухолевых клеток. У мышей, подверженных фармакологической блокировке TNF/LТα происходит значительное снижение роста опухоли MCA 205 фибросаркомы, который коррелирует с замедлением накопления MDSC в крови. При этом мы не обнаружили различий в содержании MDSC в селезенке и в опухоли, вероятно, в нашей модели, системная анти-TNF/LTα терапия не влияет на миграцию MDSC в сайт воспаления и в иммунные органы. При системной анти-TNF/LТα терапии наблюдается значимое изменение в уровне экспрессии важных противовоспалительных генов: понижение tgf-β, il-10, adam-17 и повышение Arg1 в 2 раза по сравнению с контрольной группой, что может свидетельствовать о функциональном изменении MDSC и приобретение менее супрессивного фенотипа. Таким образом, мы показали, что системная анти-TNF терапия замедляет рост опухоли, снижает накопление MDSC в крови, и влияет на экспрессию генов, специфичных для MDSC в экспериментальной модели с перевиваемой опухолевой линией MCA 205 фибросаркомы. В экспериментах с дифференцировкой миелоидных клеток in vitro было установлено, что блокировка TNF влияет на состав незрелых миелоидных клеток:приводит к увеличению гранулоцитарной фракции и уменьшению моноцитарной, данный результат дополняет сведения о роли TNF в развитии MDSC. Для изучения свойств фармакологических блокаторов TNF человека, ранее в лаборатории были созданы мыши, гуманизированные по гену TNF. В ходе работы было показано, что hTNF KI мыши развивают опухоли также как и мыши линии C57Bl/6. Подкожное или внутрибрюшинное введение MCA 205 фибросаркомы и EL4 Т-клеточной лимфомы приводит к накоплению MDSC в крови до 40% и 80%, соответственно, в обеих экспериментальных группах. Мы обнаружили, что блокировка TNF этанерцептом и инфликсимабом приводит к снижению роста опухоли MCA 205, и это коррелирует с уменьшением накопления миелоидных клеток в крови мышей, гуманизированных по гену TNF. Кроме того, системная анти-TNF терапия приводит к изменению супрессивных свойств миелоидных клеток. MDSC, выделенные из селезенок мышей на фоне анти-TNF терапии, не ингибировали пролиферацию Т-клеток. Таким образом, мы обнаружили, что системная анти-TNF терапия замедляет рост опухоли, снижает накопление MDSC в крови, влияет на экспрессию генов, изменяет супрессивные свойства миелоидных клеток в экспериментальной модели с перевиваемой опухолевой линией MCA 205 фибросаркомы.