|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
ОТЛИЧИЯ ВРЕМЕНИ ЖИЗНИ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ТРИПТОФАНОВЫХ ОСТАТКОВ В РЦ ПУРПУРНЫХ БАКТЕРИЙ ЗАМОРОЖЕННЫХ ДО 80 К В ТЕМНОТЕ ИЛИ НА АКТИВИРУЮЩЕМ СВЕТУтезисы доклада
- Авторы: Нокс П.П., Красильников П.М., Корватовский Б.Н., Гришанова Н.П., Сейфуллина Н.Х., Пащенко В.З., Рубин А.Б.
- Сборник: V Съезд биофизиков России. 4-10 октября 2015 года
- Том: 1
- Тезисы
- Год издания: 2015
- Место издания: Ростов- на-Дону Ростов-на-Дону
- Аннотация: Фотосинтетические реакционные центры (РЦ) бактерий Rb. sphaeroides охлаждали до 80 К в темноте или на активирующем свету в условиях реализации обратимого фотопереноса электрона между димером бактериохлорофилла (Р) и хинонными акцептороми и измеряли времена жизни триптофановых остатков в структуре РЦ, для чего использовали установку счета фотонов TCSPC Simple Tau 140. Флуоресценцию возбуждали лазером EPLED при 280 нм. Флуресценцию образцов регистрировали с помощью 16-канального многоанодного фотоумножителя Hamamatsu К5900. Кинетику флуоресценции апроксимировали модельной кривой в двухкомпонентном приближении, среднее время жизни (τср)вычисляли как сумму произведений времен и весов соответствующих компонентов. τср при 295 К для РЦ в водно-глицериновой (70%) среде, измеренное в максимуме интенсивности флуоресценции при ≈ 330 нм, составляло 1,5-2 нс. Максимум интенсивности флуоресценции в замороженных до 80 К РЦ сдвигался к ≈ 320 нм, τср в охлажденных до 80 К в темноте РЦ удлинялось до 2,5-3 нс, в охлажденных на свету РЦ оно было на 0,2-0,3 нс короче. Различия в τср сохранялись при последующем нагревании этих образцов до ~ 250 К, после чего они нивелировались. В сухой пленке РЦ τm при 295 К составляло ≈ 0,8 нс, при 80 К - ≈ 0,9 нс. Разницы при охлаждении в темноте или на свету сухой пленки РЦ не выявлено. Был выполнен компьютерный расчет колебательного спектра молекулы триптофана и определены нормальные колебательные моды, связанные с деформационными колебаниями ароматических колец триптофана, которые могут быть активными в процессе ее безизлучательного перехода из возбужденного в основное состояние. Наблюдаемые различия в τср для охлаждаемых в темноте или на свету РЦ могут быть связаны со сменой активности этих колебательных мод, что обусловлено локальными изменениями микроокружения триптофанилов в структуре РЦ при световой активации, фиксируемыми последующим замораживанием РЦ на свету. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований, грант № 13–04–00403а.
- Добавил в систему: Пащенко Владимир Захарович