|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
ОТЩЕПЛЕНИЕ N-КОНЦЕВОГО ОСТАТКА МЕТИОНИНА УВЕЛИЧИВАЕТ БИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ АНТАГОНИСТА РЕЦЕПТОРА ИНТЕРЛЕЙКИНА–36 ЧЕЛОВЕКА (IL-36RA)тезисы доклада
- Авторы: Нимирицкий П.П., Колобов А.А., Кондратьева Е.В.
- Сборник: Фундаментальная наука и клиническая медицина — Человек и его здоровье: Тезисы XVIII Международной медико-биологической конференции молодых исследователей, посвященной двадцатилетию медицинского факультета СПбГУ. ISSN 2221–5654
- Тезисы
- Год издания: 2015
- Место издания: Издательствово СПбГУ Санкт-Петербург
- Первая страница: 377
- Последняя страница: 378
- Аннотация: Отщепление N-концевого остатка метионина увеличивает биологическую активность антагониста рецептора интерлейкина-36 человека (IL-36Ra) Введение: Антагонист рецептора интерлейкина-36 (IL-36Ra) функционирует в покровных тканях как противовоспалительный цитокин, подавляющий активность интерлейкина-36γ (IL-36γ). Физиологическая роль IL-36Ra и IL-36γ, по всей видимости, связана с регуляцией процессов воспаления в коже. Было показано, что мутации в гене рецепторного антагониста интерлейкина 36 (ген IL36RN) приводят к развитию тяжелого заболевания – генерализованного пустулярного псориаза. Неоднократно высказывались предположения о возможности использования рекомбинантного IL-36Ra человека в терапии псориаза. Разработка кандидатного препарата требует поиска наиболее биологически активной и стабильной формы белка. Целью данной работы было экспериментально проверить ранее высказанную гипотезу о том, что протеолитическое отщепление N-концевого остатка метионина способно увеличивать биологическую активность IL-36Ra. Результаты: Рекомбинантный IL-36Ra человека был получен нами в E.coli BL21 DE3 в растворимой форме. Методика очистки включала в себя ионообменную хроматографию на сорбенте Q-XL (GE Life Sciences), осаждение примесных белков 1М сульфатом аммония и гидрофобную хроматографию на сорбенте Butyl-TSK (Tosoh). Белок был очищен до 98% чистоты по данным ОФ- ВЭЖХ анализа. Часть полученного препарата была обработана рекомбинантной метионинаминопептидазой человека (MetAP) (R&DTechnologies). Сравнение биологической активности обработанного MetAP и необработанного образцов выявило двукратное увеличение биологической активности обработанного MetAP образца по сравнению с необработанным. Было показано, что 50% конкурентное ингибирование активности IL-36γ рецепторным антагонистом интерлейкина-36 достигается уже при эквимолярном соотношении между ними. Заключение: В нашем исследовании мы показали, что посттрансляционное отщепление метионина в 2 раза увеличивает биологическую активность IL-36Ra. Доказательство этого факта является важным шагом на пути к созданию активной субстанции на основе IL-36Ra для фармакологического применения.
- Добавил в систему: Нимирицкий Петр Петрович