Марганец-зависимая рибонуклеотидредуктаза Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii: частичная очистка, характеристика и роль в биосинтезе ДНКстатьяИсследовательская статья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Информация о цитировании статьи получена из
Scopus
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 января 2020 г.
Аннотация:Propionibacterium freudenreichii, подобно Lactobacillus leichmanii, Rhizobium meliloti и Euglena gracilis, вовлекает кобаламин в анаболизм ДНК посредством аденозилкобаламин-зависимой рибонуклеотидредуктазы. Но в отличие от указанных микроорганизмов, в отсутствие корриноидов она способна синтезировать ДНК благодаря функционированию альтернативной, независимой от аденозилкобаламина, редуктазы. Настоящая работа направлена на изучение этой двойственности, впервые обнаруженной на примере P. freudenreichii. Показано, что альтернативная рибонуклеотидредуктаза локализована как в цитоплазме (80% активности экстракта клеток), так и в цитоплазматической мембране, с которой она слабо связана. С использованием препарата фермента, выделенного и частично очищенного из экстракта дефицитных по корриноидам клеток, установлено, что марганец специфически стимулирует его активность, а сам фермент состоит из двух белковых компонентов, что свойственно всем известным металлсодержащим редуктазам, активируемым молекулярным кислородом. В дефицитных по корриноидам и лимитированных по марганцу клетках бактерий выявлено ускорение образования ДНК под действием соли марганца (при низких концентрациях) и нивелирование эффекта марганца в присутствии 80 мМ гидроксимочевины - специфического ингибитора металлсодержащих аэробных рибонуклеотидредуктаз. Сделано заключение, что в условиях дефицита аденозилкобаламина в клетках P. freudenreichii синтез ДНК обеспечен дезоксирибозильными предшественниками за счёт функционирования аэробной двухкомпонентной рибонуклеотидредуктазы, включающей марганец.