КЛОНИРОВАНИЕ, ВЫДЕЛЕНИЕ И ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ НОВОЙ ГОМОЛОГИЧНОЙ ЭКЗО-АРАБИНАЗЫ ГРИБА Penicillium canescensстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 29 мая 2019 г.
Аннотация:Исследован новый фермент экзо-арабиназа (GH93, экзо-АБН), продуцируемый аскомицетным гри-бом Penicillium canescens. В результате клонирования гена abn1, кодирующего экзо-АБН, в штамм-ре-ципиент P. canescens RN3-11-7 получены рекомбинантные штаммы-продуценты, способные с высо-ким выходом продуцировать внеклеточную экзо-АБН (20–30% от общего количества внеклеточногобелка). С помощью хроматографических методов была получена гомогенная по данным электрофо-реза в ПААГ с Na-ДДС экзо-АБН с молекулярной массой 47 кДа. Фермент обладал высокой удельнойактивностью по отношению к линейному арабинану (117 ед./мг), низкой – к разветвленному араби-нану и арабиноксилану (4–5 ед/мг), а также пара-нитрофенил-α-L-арабинофуранозиду (0.3 ед/мг),не гидролизовал арабиногалактан и пара-нитрофенил-α-L-арабинопиранозид – субстраты, содер-жаще арабинозу в пиранозной форме. Основным продуктом гидролиза линейного арабинана былаарабиногексаоза. Экзо-АБН имела рН-оптимум 5.0, температурный оптимум – 60 °C, была стабильнав широком диапазоне рН 4.0–7.0 и при нагревании до 50 °C в течение 180 мин. Проведен глубокийгидролиз линейного и разветвленного арабинанов под действием смесей экзо- и эндо-арабиназ, ара-бинофуранозидазы и арабинофуран-арабиноксилангидролазы. Достигнута степень конверсии суб-стратов 67 и 83% соответственно от максимально возможной.