|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Варианты синтезированного в Escherichia coli рекомбинантного эритропоэтина человека: влияние дополнительных доменов на активность in vitro и in vivoстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАКСтатья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 29 мая 2019 г.
- Авторы: Карягина А.С., Грунина Т.М., Лящук А.М., Воронина Е.В., Марыгин Р.А., Черепушкин С.А., Трусова И.Н., Гришин А.В., Попонова М.С., Орлова П.А., Манских В.Н., Струкова Н.В., Генералова М.С., Никитин К.Е., Соболева Л.А., Бокша И.С., Громов А.В.
- Журнал: Биохимия
- Том: 84
- Номер: 1
- Год издания: 2019
- Издательство: ФГБУ "Издательство "Наука"
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 85
- Последняя страница: 99
- DOI: 10.1134/S032097251901007X
- Аннотация: Целью работы являлась сравнительная характеристика трех вариантов синтезированного в клетках Escherichia coli рекомбинантного эритропоэтина человека с дополнительными белковыми доменами: белка 6His-s-tag-EPO, несущего на N-конце s-tag – 15-звенный олигопептид из рибонуклеазы А поджелудочной железы быка, и белков HBD-EPO и EPO-HBD, содержащих, соответственно, в N- и C-концевых положениях дополнительный гепарин-связывающий домен (HBD) из костного морфогенетического белка BMP-2 Danio rerio. В качестве препарата сравнения был использован коммерческий препарат эпостим (ООО «Фарма- парк», Россия), полученный синтезом в клетках яичников китайского хомячка. Белок EPO-HBD – вариант синтезированного в E. coli рекомбинантного эритропоэтина c доменом HBD на C-конце, присоединенный к эритропоэтиновому домену жестким междоменным спейсером, – имеет лучшие характеристики по сравнению с белком HBD-EPO c обратной последовательностью соединения доменов. Белок EPO-HBD обладает повышенной в ~13 раз биологической активностью in vitro, заключающейся в способности вызывать пролиферацию клеток эритролейкемии человека TF-1, большей скоростью ассоциации с рецептором эритропоэтина EPOR, а также лучшими среди четырех исследованных белков параметрами связывания и пролонгированного выхода из носителя – деминерализованного костного матрикса (ДКМ). При подкожном введении EPO-HBD, иммобилизованного на ДКМ, наблюдается существенно более выраженная васкуляризация окружающих тканей, чем при введении ДКМ с другими белками и ДКМ без нанесенного белка. Таким образом, по всем изученным параметрам белок EPO-HBD обладает лучшими характеристиками в сравнении с другими исследованными вариантами EPO, и представляется перспективным изучение возможности его медицинского применения.
- Добавил в систему: Карягина-Жулина Анна Станиславовна