Аннотация:Митохондриальный Комплекс I и гомологичные NADH:хинон-редуктазы 1 типа (NDH-1) бактерий катализируют окисле-ние NADH хинонами, сопряженное с векторной транслокацией 4 протонов через сопрягающую мембрану. Комплекс I содер-жит прочно связанный FMN, 7-8 железо-серных кластеров и связанный хинон. Механизм сопряжения транспорта электронов и векторной транслокации протонов неизвестен и является одной из главных нерешенных проблем современной биоэнерге-тики.
Недавно мы показали ATP-зависимый сукцинат-поддерживаемый обратный перенос электронов на искусственный акцептор электронов гексаамминорутений (III) (HAR) Комплексом I в составе субмитохондриальных частиц (СМЧ) сердца быка. Оказалось, что этот путь нечувствителен к ингибированию NADH-связывающего центра фермента специфическим ингибитором – NADH-OH.
В настоящей работе мы показали, что 1) NADH:HAR-редуктазные активности СМЧ и СБЧ характеризуются различающейся немихаэлисовской кинетикой, которую можно объяснить существованием двух различных центров и/или механизмов восстановления этого акцептора. 2) Комплекс I и NDH-1 отличаются по параметрам взаимодействия NADH-связывающего центра с NADH-OH. 3) Блокирование NADH-связывающего центра NDH-1 этим ингибитором не препятствует энергозависимому восстановлению HAR. Таким образом, предложенная нами модель обратного переноса электронов от QH2 на HAR экспериментально подтверждена для первого пункта сопряжения дыхательной цепи прокариот.