Механизм образования холофермента простагландин-H-синтазы. Аллостерические эффекты

Кривошей, А.В.; Бархатов, В.И.; Вржещ, П.В.

Авторы: Кривошей А.В., Бархатов В.И., Вржещ П.В.
Журнал: Acta Naturae (русскоязычная версия)
Том: 2
Номер: спецвыпуск
Год издания: 2019
Издательство: Парк-медиа
Местоположение издательства: М.
Первая страница: 134
Последняя страница: 135
Аннотация: Гемопротеин простагландин-H-синтаза (PGHS) является центральным звеном синтеза простагландинов (регуляторов важных физиологических процессов, медиаторов боли и воспаления) из арахидоновой кислоты. Фермент катализирует две последовательные реакции – циклооксигеназную (ингибируется нестероидными противовоспалительными препаратами) и пероксидазную. Кофактор гем (Fe-протопорфирин IX) связан с пероксидазным сайтом. Удаление гема приводит к полной потере каталитической активности белка, уменьшает его устойчивость к внешним воздействиям, а также понижает сродство фермента к аспирину. Механизм образования холофермента PGHS исследован недостаточно. В литературе установлен обратимый характер образования комплекса апофермента с гемом и приводятся оценки равновесной константы диссоциации (от 5 до 1600 нМ). Исследование кинетики ассоциации и диссоциации холофермента показало, что взаимодействие апофермента PGHS с гемом описывается одностадийной моделью: кинетические константы скорости присоединения гемовой группы к апоферменту и её диссоциации – 2,8×105 М-1×сек-1 и 3,9×10-3 сек-1 соответственно, равновесная константа диссоциации – 1,4×10-8 М, характерное время диссоциации холофермента – 4 мин (25°C, pH 8.0, твин-20 – 0,1% (v/v)), специфическая активность PGHS-1 – 60 сек-1, коэффициент экстинкции холофермента (в максимуме поглощения при 410 нм) – 320 мМ-1×см-1. Продемонстрировано, что апофермент, в отличие от холофермента, не инактивируется в присутствии арахидоновой кислоты, а также практически не взаимодействует с обратимыми ингибиторами (напроксен, индометацин, диклофенак), что позволяет сделать вывод о наличии аллостерических взаимодействий между циклооксигеназным и пероксидазным сайтами. Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 19-04-01150а с использованием оборудования, приобретенного за счет средств Программы развития Московского университета, и оборудования Центра коллективного пользования сверхвысокопроизводительными вычислительными ресурсами МГУ имени М.В. Ломоносова.
Добавил в систему: Кривошей Александр Владимирович

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИПМех РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИПМех РАН

Механизм образования холофермента простагландин-H-синтазы. Аллостерические эффектыстатья Тезисы

Прикрепленные файлы