Аннотация:Рассматриваются данные контроля состояния водной экосистемы, полученные при регистрации изменений пространственно-временных параметров целых клеток и их внешних структур с использованием спектроскопии внутреннего отражения. В качестве биоиндикатора применяется диализная культура микроводорослей с контролируемой “внешней средой”.
Диализное культивирование представляет собой одну из разновидностей иммобилизованных культур. Исследуемая суспензионная культура отделена от “внешнего объема” среды мембраной с размерами пор, пропускающих соединения с определенной молекулярной массой, через которую осуществляется диффузия веществ. Метод известен с 70-х гг. ХХ в., и использовался главным образом для биоиндикации (влияния экологических факторов на фитопланктон) – взятая проба фитопланктона помещалась в камеру, с двух сторон ограниченную полупроницаемой мембраной и возвращалась в исследуемый водоём. В данном случае предлагается использовать чистые лабораторные культуры цианобактерий и микроводорослей (для стандартизации физиологических откликов), т.е. метод относится к биотестированию. Особенности метода лучше проявляются при максимальном соотношении поверхности и объема диализной мембраны: лучшая форма диализного мешка не шар, а длинный цилиндр, полностью погруженный в 5 – 10-кратный объем «внешней среды» , что обеспечивает непрерывное поступление питательных веществ и отток метаболитов, ингибирующих клеточное деление. Диализная мембрана разделяет внеклеточные метаболиты на высокомолекулярные, накапливающиеся в диализном мешке, и низкомолекулярные — во внешнем объеме. Полученная система представляет упрощенную модель функционирования природной биопленки цианобактерий (т.е. биологического сообщества): во “«внутреннем” объеме накапливаются высокомолекулярные полисахариды, которые объединяют отдельные клетки и создают вокруг них специфические условия – организмы развиваются не в водно-солевой среде, а в коллоидном матриксе, опосредующем воздействия внешней среды на организм.
Наибольшей чувствительностью к токсическим воздействиям характеризуются культуры физиологически молодых клеток, выращенных на минимальных средах. Таким образом, условием получения тест-культур, наиболее отвечающих свойствам природной популяции, является истощение клеточных резервов. Культуру в диализном мешке легко перемещать из одной среды в другую: на минимальных средах это позволяет обеспечивать истощение клеточных резервов для увеличения чувствительности культур при одновременном удалении продуктов автоингибирования. Клетки в диализном мешке остаются в стерильных условиях, что позволяет изучать физиологические изменения культур в любых загрязненных средах, включая естественные водоемы .