Аннотация:Эндогенный белок Lynx1 принадлежит к семейству Ly6/uPAR белков. Было
показано, что он связывается с различными субъединицами никотиновых
ацетилхолиновых (нАх) рецепторов. Известно, что, нАх-рецепторы в мозге
вовлечены в механизмы памяти и обучения. В постнатальном периоде экспрессия
α2, α4, α7 и β2 субъединиц практически совпадает с экспрессией Lynx1 в клеточных
культурах нейронов коры крыс. Ранее с применением электрофизиологической
методики на ооцитах, содержащих α7-ой тип нАх-рецепторов, было установлено, что
Lynx1 выступает в качестве модулятора α7Ах-рецепторов.
В данной работе ставилась задача посмотреть влияние рекомбинантного
аналога человеческого эндогенного белка Lynx1 (ws-Lynx1) на нативные α7-Ах-
рецепторы. С этой целью были взяты 17-20-ти дневные крысята обоих полов, так как
к этому возрасту достигается уже взрослый уровень экспрессии α7-Ах-рецепторов.
Предварительно, было установлено, что большинство интернейронов первого слоя
коры отвечают на аппликацию ацетилхолина. Кроме этого, было показано, что Lynx1
не синтезируется в этом слое, несмотря на наличие интернейронов, содержащих
нАх-рецепторы, что исключало вклад воздействия нативного Lynx1 на
ацетилхолиновый ответ. Используя электрофизиологическую методику пэтч-кламп и
систему быстрой аппликации вещества, регистрировали токи в интернейронах в
ответ на аппликацию ацетилхолина (1 мМ) в присутствии блокаторов мускариновых
Ах-рецепторов атропина (200 нМ) и тетродотоксина (300 нМ). Растворимую форму
ws-Lynx1 добавляли во внеклеточный раствор. Было выявлено, что ws-Lynx1 при
концентрации 1 мкМ не влияет на Ах-вызванный ток в интернейронах первого слоя,
в то время как при концентрации 10 мкМ ws-Lynx1 амплитуда ответа увеличивалась
до 30%. После каждой экспериментальной серии применялись следующие
селективные ингибиторы MLA (4 мкМ) и DHbE (8 mM) для идентификации типов нАх-
рецепторов. Было установлено, что основной вклад в регистрируемые Ах-вызванный
токи вносят α7Ах-рецепторы.
Таким образом, было показано, что растворимая рекомбинантная форма wsLynx1
действует на нативные α7-Ах-рецепторы в мозге 17-20-ти дневных крысят в
концентрации 10 мкМ.
Работа была проведена при поддержке гранта РФФИ №16-34-01302.