|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Эффект эндогенного модулятора Lynx1 на никотиновые ацетилхолиновые рецепторы в мозге 17-20-ти дневных крысяттезисы доклада
- Авторы: Васильева Н.А., Шулепко М.А., Кульбацкий Д.С., Шенкарев З.О., Долгих Д.А., Люкманова Е.Н.
- Сборник: Материалы XVII Конференции - школы с международным участием "АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ БИОЛОГИИ РАЗВИТИЯ"
- Тезисы
- Год издания: 2016
- Первая страница: 14
- Последняя страница: 15
- Аннотация: Эндогенный белок Lynx1 принадлежит к семейству Ly6/uPAR белков. Было показано, что он связывается с различными субъединицами никотиновых ацетилхолиновых (нАх) рецепторов. Известно, что, нАх-рецепторы в мозге вовлечены в механизмы памяти и обучения. В постнатальном периоде экспрессия α2, α4, α7 и β2 субъединиц практически совпадает с экспрессией Lynx1 в клеточных культурах нейронов коры крыс. Ранее с применением электрофизиологической методики на ооцитах, содержащих α7-ой тип нАх-рецепторов, было установлено, что Lynx1 выступает в качестве модулятора α7Ах-рецепторов. В данной работе ставилась задача посмотреть влияние рекомбинантного аналога человеческого эндогенного белка Lynx1 (ws-Lynx1) на нативные α7-Ах- рецепторы. С этой целью были взяты 17-20-ти дневные крысята обоих полов, так как к этому возрасту достигается уже взрослый уровень экспрессии α7-Ах-рецепторов. Предварительно, было установлено, что большинство интернейронов первого слоя коры отвечают на аппликацию ацетилхолина. Кроме этого, было показано, что Lynx1 не синтезируется в этом слое, несмотря на наличие интернейронов, содержащих нАх-рецепторы, что исключало вклад воздействия нативного Lynx1 на ацетилхолиновый ответ. Используя электрофизиологическую методику пэтч-кламп и систему быстрой аппликации вещества, регистрировали токи в интернейронах в ответ на аппликацию ацетилхолина (1 мМ) в присутствии блокаторов мускариновых Ах-рецепторов атропина (200 нМ) и тетродотоксина (300 нМ). Растворимую форму ws-Lynx1 добавляли во внеклеточный раствор. Было выявлено, что ws-Lynx1 при концентрации 1 мкМ не влияет на Ах-вызванный ток в интернейронах первого слоя, в то время как при концентрации 10 мкМ ws-Lynx1 амплитуда ответа увеличивалась до 30%. После каждой экспериментальной серии применялись следующие селективные ингибиторы MLA (4 мкМ) и DHbE (8 mM) для идентификации типов нАх- рецепторов. Было установлено, что основной вклад в регистрируемые Ах-вызванный токи вносят α7Ах-рецепторы. Таким образом, было показано, что растворимая рекомбинантная форма wsLynx1 действует на нативные α7-Ах-рецепторы в мозге 17-20-ти дневных крысят в концентрации 10 мкМ. Работа была проведена при поддержке гранта РФФИ №16-34-01302.
- Добавил в систему: Васильева Наталья Александровна