|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Влияние димерных бисбензимидазолов, содержащих пиперазиновый цикл в линкере, на метилирование ДНК в клетках рака молочной железыстатья
- Авторы: Храброва Д.А., Громова Е.С., Вейко Н.Н., Ташлицкий В.Н., Костюк С.В., Кваша М.А., Жузе А.Л., Коваль В.С., Ершова Е.С., Иванов А.А.
- Журнал: Успехи молекулярной онкологии
- Том: 3
- Номер: 4
- Год издания: 2016
- Издательство: АБВ-пресс
- Местоположение издательства: М.
- Первая страница: 83
- Последняя страница: 83
- Аннотация: Введение. Метилирование ДНК, осуществляемое ДНК-метилтрансферазами (МТаз), – одна из наиболее активно изучаемых эпигенетических модификаций, играющая важную роль в контроле экспрессии геновв клетках эукариот. В нормальных клетках создается свой профиль метилирования, однако в раковых клетках наблюдается гиперметилирование СpG-островков в промоторных областях генов-супрессоров опухолей. Ингибиторы МТаз вызывают реактивацию этих генов,что позволяет их использовать в противоопухолевой терапии. Ранее в качестве ингибиторов МТаз нами были сконструированы димерные бисбензимидазолы с пиперазиновым циклом в олигометиленовом линке- ре между бисбензимидазольными фрагментами, DBP (n) (n – число метиленовых звеньев) [1]. Эти соедине- ния растворимы в воде, и в микромолярных количе- ствах ингибируют прокариотическую МТазу М.SssI. Задачи исследования. Изучение влияния DBP (1–4) на метилирование ДНК в клетках рака молочной же- лезы MCF-7. Исследовать проникновение DBP (1–4) в раковые клетки, оценить влияние DBP (1–4) на об- щий уровень метилирования геномной ДНК и степень метилирования промоторных участков нескольких генов, изучить возможность реактивации генов-су- прессоров опухолей под действием DBP (1–4). Материалы и методы. Проникновение DBP (1–4) в клетки MCF-7 анализировали с помощью флуорес- центной микроскопии. Для оценки влияния DBP (1–4) на общее метилирование геномной ДНК использова- ли иммунофлуоресцентный и иммуноферментный анализы и метод UPLC/MS/MS. Метилирование про- моторных областей генов RARB и PTEN определяли по расщеплению ДНК метилчувствительными эндо- нуклеазами. За экспрессией генов-супрессоров в клет- ках MCF-7 в присутствии DBP (1–4) следили, измеряя уровень матричной РНК с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Результаты. Показано, что DBP (1–4) локализуют- ся, главным образом, в ядрах раковых клеток. Эти со- единения были обнаружены также в митохондриях; их влияния на окислительный стресс не наблюдалось. Продемонстрировано, что DBP (1–4) оказывают не- большой деметилирующий эффект на геномную ДНК в клетках MCF-7. Обнаружена способность DBP (1–4) уменьшать степень метилирования промоторных об- ластей генов-супрессоров опухолей RARB и PTEN. Соединения DBP (2) и DBP (4) способствуют реэкс- прессии генов CDKN2A и RUNX3, а DBP (1) – генов CDKN2A, Apaf-1, RUNX3, APC и RARB, «молчащих» в клет- ках MCF-7 из-за гиперметилирования промоторных областей. Выводы. DBP (n), возможно, в дальнейшем могут быть использованы для подавления роста опухолей. Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (грант 6-04-01087). 1. Ivanov A.A., Koval V.S., Susova O.Yu. et al. DNA specific fluorescent
- Добавил в систему: Громова Елизавета Сергеевна