Аннотация:Линия клеток яичника китайского хомячка CHO широко используется в биофармацевтическом производстве. Редактирование генома позволяет улучшить ростовые свойства клеток, их ауксотрофность, работу систем индукции апоптоза и аутофагии. Одновременное редактирование многих генов позволяет получить линию с требуемым генотипом быстрее, чем при последовательных геномных нокаутах, но с меньшей вероятностью. При одновременном редактировании генов dhfr, glul, bak1, bax в геноме клеток CHO S получено 24 клона с признаками ауксотрофности по тимидину и глутамину. Среди них обнаружено пять dhfr+/- клонов, все они содержали нокаут одного или двух аллелей glul. В одном клоне было инактивировано сдвигом рамки 7 целевых аллелей из 8 и частично инактивирован второй аллель dhfr инсерцией триплета GAA, что снизило активность фермента в 2.5 раза. Вероятность одновременного нокаута обоих аллелей dhfr была увеличена до 50% при редактировании генома парой гидовых РНК, направленных к одному экзону гена dhfr.