|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Исследование регуляции АТФазной активности FOF1-АТФ-синтазы Bacillus subtilisтезисы доклада Тезисы
- Авторы: Зубарева В.М., Третьяков Д.О., Лапашина А.С., Фенюк Б.А.
- Сборник: III Объединенный научный форум физиологов, биохимиков и молекулярных биологов. VII съезд биохимиков России. X Российский симпозиум "Белки и пептиды". VII съезд физиологов СНГ. Сочи, Дагомыс, 3–8 октября 2021. Научные труды
- Том: 2
- Тезисы
- Год издания: 2021
- Издательство: Общество с ограниченной ответственностью Издательство Перо
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 76
- Последняя страница: 76
- Аннотация: FOF1-АТФ-синтаза — важнейший фермент, катализирующий синтез АТФ за счет энергии трансмембранной разностиэлектрохимического потенциала протонов. Также он может гидролизовать АТФ, генерируя разность потенциалов на мембране. АТФазная активность фермента подвержена неконкурентному ингибированию комплексом MgАДФ, а также может ингибироваться С-концом субъединицы 𝜀. Взаимодействие двух типов ингибирования точно не установлено: часть авторовсчитает, что С-концевой домен 𝜀-субъединицы противодействует АДФ-ингибированию и повышает АТФазную активность фермента, другие, напротив, предполагают, что оба типа ингибирования поддерживают друг друга. Целью работы было изучение взаимодействия 𝜀-ингибирования и АДФ-ингибирования в АТФ-синтазе Bacillus subtilis. Для этого было проведеносравнение ферментов 4 штаммов: дикого типа, с делецией С-концевого домена субъединицы 𝜀 (𝜀𝛥C), с точечной заменойβQ259L, которая, как известно, ослабляет АДФ-ингибирование, и двойного мутанта βQ259L+𝜀𝛥C. Сравнение проводилось на инвертированных суббактериальных частицах (СБЧ). Как и ожидалось, добавление АДФ подавляло АТФазную активность СБЧ штамма βQ259L слабее, чем в диком типе. Мутация 𝜀𝛥C сама по себе не привела к снижению ингибиторного эффекта АДФ. Замена βQ259L, как и ожидалось, привела к меньшей чувствительности фермента к АДФ. На фоне данной мутации наблюдался эффект С-концевого домена субъединицы 𝜀: СБЧ двойного мутанта оказались наименее чувствительны к добавлению АДФ. Сульфит, препятствующий MgАДФ-ингибированию, стимулировал АТФазную активность СБЧ дикого типа и 𝜀𝛥C в равной степени (до 6-7 раз). В то же время, активность СБЧ штамма βQ259L в тех же условиях стимулировалась сульфитом менее чем вдвое, как и предполагалось в случае ослабленного АДФ-ингибирования. Наконец, АТФазная активность СБЧ двойного мутанта βQ259L+𝜀𝛥C практически не менялась при добавлении сульфита. Эти данные согласуются с гипотезой, что С-концевой домен субъединицы 𝜀 поддерживает АДФ-ингибирование.Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант 20-14-00268)
- Добавил в систему: Лапашина Анна Сергеевна