Методика получения очищенного антигена SARS-CoV-2 для структурных и иммунологических исследований цельновирионных вакцин против коронавирусной инфекциистатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Аннотация:Актуальность. Несмотря на масштабные разработки вакцин против коронавирусной инфекции, до сих пор нет полной информации об антигенной структуре вирусной частицы SARS-CoV-2. В этой статье описывается метод получения чистого концентрированного цельновирионного препарата вируса, который может быть использован в различных исследованиях.
Цель. Разработать оптимальную методику очистки инактивированного вируса SARS-CoV-2 для получения препарата по чистоте и содержанию антигена достаточного для проведения структурных и иммунологических исследований.
Методология. Для получения чистого концентрированного вируса SARS-CoV-2 использовали метод ультрацентрифугирования в плотности сахарозного градиента. Фракции с наибольшим содержанием вирусных частиц оценивали по концентрации нуклеокапсида N и гликопротеина S. Чистоту объединенных фракций (очищенного образца) оценивали по наличию примесных белков, токсинов и бычьего сывороточного альбумина.
Результаты исследования. Определены оптимальные условия получения инактивированного очищенного цельного вируса SARS-CoV-2. Выделен и охарактеризован стандартный образец вируса SARS-CoV-2.
Заключение. Полученный стандартный образец можно использовать в иммуноферментном анализе для измерения количества антигена в цельновирионных вакцинах против коронавирусной инфекции, а также в различных исследованиях структуры вирусной частицы SARS-CoV-2.