|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Получение и стандартизация оригинальной генотерапевтической конструкции для стимуляции регенерации нервной тканистатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК- Авторы: Карагяур М.Н., Ростовцева А.И., Климович П.С., Балабаньян В.Ю., Стамбольский Д.В.
- Журнал: Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии
- Номер: 2
- Год издания: 2023
- Издательство: Общество с ограниченной ответственностью Издательский дом Русский врач
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 32
- Последняя страница: 36
- DOI: 10.29296/25877313-2023-02-05
- Аннотация: Травматические повреждения периферических нервов являются одной из самых частых причин стойкой утраты трудоспособности. Проблема регенерации нервных стволов состоит в медленном росте нервных волокон и краткосрочности продукции нейтрофических факторы (NGF, BDNF, NT-3, GDNF и др.), стимулирующих выживание поврежденных нейронов и рост нервных волокон. Естественного регенераторного потенциала в большинстве случаев недостаточно для полноценного восстановления иннервации, что требует проведения заместительной терапии нейротрофическими факторами. Одним из перспективных терапевтических подходов является применение генотерапевтических конструкций, что позволяет обеспечить продолжительную локальную продукцию факторов, стимулирующих регенерацию в зоне повреждения. Ранее на основе модифицированной плазмидной конструкции pVaxl, одобренной FDA (U.S. Food and Drug Administration), авторами была создана бицистронная генотерапевтическая конструкция pNCure (plasmid for Nerve Cure), кодирующая последовательности кДНК мозгового нейротрофического фактора (BDNF) и активатора плазминогена урокиназного типа (иРА), которая продемонстрировала значительную терапевтическую активность на модели травмы периферического нерва у мышей. Генотерапевтические препараты представляют собой новый класс лекарственных средств, требующих особенного подхода к получению, очистке и стандартизации. В русской литературе практически не встречается информации, посвященной вопросам очистки и стандартизации препаратов данного класса, поэтому подробное их освящение стало темой данной публикации. В данной работе рассмотрены вопросы получения генотерапевтической конструкции путем ее наработки в клетках Е. coli с последующей многоступенчатой очисткой, а также вопросы оценки подлинности генотерапевтической конструкции (методы ПЦР и УФ-спектрометрии), определения родственных и посторонних примесей, определения pH и количества плазмидной ДНК в субстанции. Результаты проведенного исследования демонстрируют, что предложенные способы получения, очистки и стандартизации плазмидной конструкции позволяют получить искомый генотерапевтический препарат высокого качества, удовлетворяющий всем требованиям Государственной фармакопии XIV, предъявляемым для генотерапевтических препаратов.
- Добавил в систему: Балабаньян Вадим Юрьевич