|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Определение концентрации антител igg и iga методом поляризации флуоресценции с применением флуоресцентно-меченных рекомбинантных нанотелстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАКСтатья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
- Авторы: Мухаметова Л.И., Еремин С.А., Михура И.В., Горяйнова О.С., Иванова Т.И., Тиллиб С.В.
- Журнал: Биоорганическая химия
- Том: 51
- Номер: 6
- Год издания: 2025
- Издательство: Российская академия наук
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 1093
- Последняя страница: 1105
- DOI: 10.7868/S1998286025060083
- Аннотация: Количественный, быстрый и высокопроизводительный анализ иммуноглобулинов IgG и IgAнеобходим для определения содержания этих белков и ассоциированных с ними молекул вфизиологических жидкостях больных. Анализ этих белков необходим при диагностике дефицитаспецифических антител в качестве вспомогательного теста для выявления общего вариабельногоиммунодефицита, а также для оценки степени риска пациентов с низким уровнем IgA. Определениесодержания IgG может помочь при назначении ревакцинации пациентам и поддержки стратегииих лечения, использоваться для мониторинга гуморальной иммунной системы пациента, атакже при разработке и последующем производстве большинства терапевтических антител вбиофармацевтике. Миниатюрные рекомбинантные однодоменные антитела (нанотела) обладаютрядом преимуществ перед классическими антителами, таких как относительная простота ихнаработки, высокая стабильность в широком диапазоне значений температуры и рН, способностьузнавать высокоспецифические конформационные эпитопы целевого белка, а также возможностьиспользования их в качестве зондов для детекции более крупных целевых белков-антигенов вметоде поляризации флуоресценции. Получены и охарактеризованы флуоресцентно-меченныенанотела FITC-anti-IgG и FITC-anti-IgА к IgG и IgA человека. Определены Kd комплексов FITC-anti-IgG*IgG и FITC-anti-IgA*IgA, подтверждающие высокую аффинность иммунореагентов. Показанавозможность специфичного определения содержания IgG и IgA в сыворотке крови человека вдиапазоне 35–120 мкг/мл (для IgA) и 75–260 мкг/мл (для IgG). Протестированы 18 сыворотокчеловека на содержание IgG и IgA, количество антител в образцах подтверждено определением сиспользованием коммерческих иммуноферментных наборов. Показано, что FITC-anti-IgG и FITC-anti-IgА не взаимодействуют с другими белками человека: альбумином, плазминогеном, фибриногеном,лактоферрином и трансферрином. Тестирование сывороток человека и животных с FITC-anti-IgGи FITC-anti-IgА продемонстрировало специфичное связывание с антисыворотками человека иобезьяны, но не с сыворотками животных: быка, собаки, кошки, кролика и овцы. Таким образом,метод FPIA может быть использован для быстрого и специфичного определения IgG и IgA человека.
- Добавил в систему: Мухаметова Лилия Инилевна
Прикрепленные файлы
| № | Имя | Описание | Имя файла | Размер | Добавлен |
|---|