ИСТИНА

Задача создания новых, более эффективных сорбентов с молекулярными отпечатками (МИП-сорбентов), способных селективно связывать низкомолекулярные органические вещества, остается актуальной. В последние годы предложено много новых подходов к получению МИП-сорбентов, однако кардинального сдвига в количественных характеристиках таких сорбентов по сравнению с периодом 1980-х-90-х гг. не произошло. Эта ситуация заставляет исследователей искать принципиально новые подходы к импринтингу. Один из возможных, но почти не разработанных подходов, – это импринтинг в биополимеры, например в белки. Целью настоящей работы было изучение возможности импринтинга модельных соединений (фенолов и красителей) в ранее не использовавшуюся для получения МИП матрицу на основе белка – бычьего сывороточного альбумина (БСА), сшитого в присутствии синтетического полиэлектролита. В работе получены растворимые комплексы БСА, катионного полиэлектролита (полиэтиленимина и полиаллиламина) и органических темплатов (метиленового синего, бромтимолового синего и гидрохинона), в том числе ковалентно сшитые (с помощью карбодиимидной сшивки или глутарового альдегида), нековалентно закрепленные на поверхности кремнеземов с привитыми иминодиацетатными и 2-карбоксиэтильными группами. Достигнут импринтинг фактор темплатов, равный 1.5-1.8, причем только в случае ковалентной иммобилизации белка с последующей сшивкой глутаровым альдегидом в присутствии в качестве темплатов метиленового синего и гидрохинона, и равный 7.3 в случае нековалентной иммобилизации комплекса белок–полиаллиламин в присутствии бромтимолового синего. Однако в последнем случае степень извлечения была низкой (не выше 10%), а высокий импринтинг фактор после повторной отмывки сорбентов от темплата не воспроизводился. Некоторые из полученных сорбентов показали высокую степень связывания темплата (600 мкг/г метиленового синего и 38 мкг/г гидрохинона, а нековалентно иммобилизованных – 1 мг/г бромтимолового синего). Молекулярно-импринтированный белок, нековалентно иммобилизованный в присутствии полиаллиламина, более селективно извлекает бромтимоловый синий по сравнению с бромкрезоловым пурпурным, бромфеноловым красным и крезоловым красным (факторы селективности составили от 1.3 до 6.3). На основе спектров поглощения в УФ-видимой области сделано предположение о гидрофобных и электростатических взаимодействиях белка с темплатами и полиэлектролитами. Получены сведения о распределении комплексов белок – полиамин в системе кремнезем – раствор. В большинстве случаев кинетика сорбции органических темплатов и других веществ на полученных сорбентах подчиняется моделям псевдо-второго или смешанного порядка.