ИСТИНА

Данный проект направлен на анализ популяций организмов с гапло- диплоидным жизненным циклом, в число которых входит съедобный гриб вешенка Pleurotus ostreatus из класса высших базидиальных грибов. В ходе исследования за отчетный период был успешно опробирован новый перспективный (разработанный нашим коллективом) метод одновременного анализа диплоидного родителя и его гаплоидного потомства (генерации базидиоспор), представленного мицелиальными пеллетами, полученными из споровых отпечатков плодовых тел. Данный подход был применен для анализа сегрегации в потомстве гаплоидных базидиоспор генных локусов, кодирующих девять внутриклеточных изоферментных систем (эстераза, фосфоглюкомутаза, фосфоглюкоизомераза, лейцинаминопептидаза и т.д.), минуя трудоемкую и требующую значительных затрат времени и ресурсов стадию скрещиваний. Подобраны полиморфные аллозимные локусы, удобные для генетического анализа, что позволило идентифицировать генотипы диплоидных (дикариотических) родителей. Для семи из 14-ти проанализированных генных локусов была обнаружена изменчивость; семь других были мономорфны. В ходе анализа для трех штаммов из коллекции оценены такие характеристики как уровень полиморфизма, ожидаемая гетерозиготность, а также проверена гипотеза моногенного наследования признаков. Проведен анализ коллекции вешенки, включающей 41 природный изолят, с применением дикарион-монокарион- и монокарион- монокарион-скрещиваний, а также анализ реакций вегетативной (гетерогенной) несовместимости с целью разграничения грибных индивидуумов. Не было обнаружено вегетативно совместимых дикарионов даже в пределах одного субстрата (бревна) и на расстоянии нескольких метров друг от друга, что свидетельствует о том, что в природных популяциях вешенка не размножается клонально (вегетативным путем). Природные популяции вешенки, как и большинства базидиальных грибов, представляют собой мозаики генетически изолированных в вегетативной фазе клонов, индивидуальность которых обеспечивается соматической несовместимостью. Анализ скрещиваний позволил выделить две четко раздельные группы интерстерильности (не скрещивающиеся друг с другом) в пределах комплексного вида P.ostreatus, а также промежуточные формы с частичной репродуктивной изоляцией, характеризующиеся полусовместимыми реакциями в скрещиваниях, что свидетельствует в пользу генетической неоднородности морфологического вида Pleurotus ostreatus s.l.. Подобного рода популяционно-генетический анализ с применением нового подхода, основанном на одновременном анализе родителей и потомков, впервые применен для популяций гриба на территории России. Результаты исследований в перспективе могут быть использованы в грибной селекции и промышленном культивировании.