ИСТИНА

Существующие вакцины против вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) достаточно эффективны. Однако они высоко реактогенны и получены на основе лабораторных штаммов, отличающихся от штаммов, циркулирующих в природных очагах. Последнее может быть причиной случаев заболеваний КЭ у полностью привитых людей. Поэтому возникает необходимость в безопасной и эффективной вакцине. Мы изучили иммунногенность препарата, содержащего домен III белка оболочки Е ВКЭ как антиген. В качестве адъванта был использован декстран и синтетические CpG олигонуклеотиды. Для оценки вариабельности домена III белка Е проанализировали 386 доступных последовательностей, полученных через БД GenBank. Результаты подтвердили существование трех диагностических позиций (313, 317 и 331), аминокислотные остатки в которых различаются для генетических типов ВКЭ (Сибирского, Европейского и Дальневосточного). Кроме того, были найдены промежуточные варианты последовательностей, которые позволяют предположить рекомбинацию между вирусами разных типов. Плазмидные конструкции, содержащие последовательность домена III белка Е трех генетических типов были получены и экспрессированы в E.coli. Антигенная структура очищенных белков подтверждена с помощью ИФА с моноклональными антителами (“ВекторВКЭ-Антиген”) и поликлональными антителами сывороток больных КЭ. В сыворотках мышей, иммунизированных препаратом на основе генноинжерного белка, методом ИФА были обнаружены антитела к штамму Софьин в концентрации 47600 ед./мл – на второй, 239000 ед./мл – на третьей, и 1635000 ед./мл на четвертой неделе после иммунизации. Реакция нейтрализации вируса в культуре клеток для препарата на основе генноинжерного белка показала пониженные относительно вакцины сравнения (Клещ-Э-Вак) титры антител к ВКЭ. На второй неделе после иммунизации для Клещ-Э-Вак нейтрализующий титр составлял 1:174, для генноинженерного препарата – 1:20. К четвертой неделе титр составлял 1:49 и 1:23 соответственно. Показано, что генноинженерный домен III белка оболочки Е ВКЭ имеет антигенную структуру, соответствующую нативному белку. Препарат на основе этого белка вызывает у животных иммунный ответ к ВКЭ, однако нуждается в дальнейшей доработке для получения ответа, сравнимого с инактивированной вакциной.