|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Клеточный каннибализм в культуре клеток эпидермоидной карциномы человека А431дипломная работа (Бакалавр)
- Научные руководители: Онищенко Г.Е., Хашба Л.А.
- Автор: Гаранина А.С.
- Тип: Бакалавр
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2010
- Аннотация: Еще в начале XX века внимание ученых привлек уникальный феномен “клетка-в-клетке”, при котором одни клетки оказываются внутри цитоплазмы других клеток. Он получил название клеточного каннибализма (КК). По ряду признаков процесс КК отличается от фагоцитоза. КК особенно характерен для клеток злокачественных опухолей. Феномен “клетка-в-клетке” в некоторых случаях используется для диагностики заболеваний и прогноза развития опухолей, однако точные механизмы, лежащие в основе этого явления, до сих пор не изучены. В связи с этим целью работы было исследование механизмов КК и поведения клеточных органелл в ходе данного процесса в культуре клеток эпидермоидной карциномы человека А431. В работе были использованы методы световой, флуоресцентной, видеомикроскопии, трансмиссионной и сканирующей электронной микроскопии. Было выявлено, что в культуре клеток А431 частота встречаемости КК в ходе длительного культивирования не изменялась, и число подобных клеток составляло около 2%. При КК происходило изменение морфологии как поглощенной, так и поглощающей клетки. Поглощенные клетки, как правило, имели округлую форму, при этом среди них встречались клетки на разных стадиях деградации. Размеры таких клеток были примерно вдвое меньше размеров соседних клеток. Поглощенные клетки находились внутри крупных вакуолярных структур. Для поглощающих клеток было характерно изменение формы и расположения ядра. Оно приобретало бобовидную форму и смещалось к периферии. Осуществление контакта между клетками происходило с участием десмосом. На начальных этапах КК наблюдалось перераспределение лизосом, митохондрий и аппарата Гольджи в поглощенной и поглощающей клетках и соответствующая перестройка системы микротрубочек, обеспечивающей перемещение данных органелл. Было выявлено снижение уровня эндоцитоза. В ходе КК происходила деградация поглощенной клетки, проявляющаяся в изменении состояния ядра и цитоплазмы последней: первоначально округлое ядро, богатое эухроматином и имеющее несколько ядрышек, приобретало все более неровные очертания и уменьшалось, хроматин постепенно конденсировался, ядрышки не выявлялись. На заключительных этапах КК ядро подвергалось фрагментации. Кроме того шло постепенное усиление вакуолизации цитоплазмы и деградация внутриклеточных органелл поглощенной клетки, а также закисление каннибалистической вакуоли. При КК не выявлены процессы, характерные для апоптотического пути клеточной гибели, такие как усиление продукции активных форм кислорода, выход цитохрома с и активация каспазы-3. Однако при этом обнаружено, что на заключительных этапах усиливаются процессы аутофагии. Таким образом, можно предположить, что при КК в субстратзависимых культурах происходит лизосомо-опосредованная деградация поглощенной клетки. Этот процесс на начальных этапах включает усиление продуцирования лизосом, источником которых могут быть как поглощающая, так и поглощенная клетки, и активацию аутофагического механизма деградации поглощенной клетки на заключительных этапах ее гибели.
- Добавил в систему: Хашба Лиа Аркадьевна