ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИПМех РАН |
||
Исследована роль спермоспецифичной глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы в подвижности сперматозоидов
В соответствии с поставленными целями проекта была изучена роль спермоспецифичной формы глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (ГАФДс) в регуляции подвижности сперматозоидов. Проведено исследование активности ГАФДс в образцах сперматозоидов с разной степенью подвижности. Показано, что активность ГАФДс в нерастворимой фракции сперматозоидов с низкой подвижностью в 2-3 раза ниже, чем активность в соответствующей фракции сперматозоидов с высокой подвижностью. Эти данные говорят о том, что активность фермента, прочно связанного с фиброзным слоем важна для подвижности сперматозоидов. Исследовано влияние перекиси водорода на подвижность сперматозоидов. Показано, что после инкубации в присутствии 3 мМ Н2О2 общая подвижность снижается в 2-3 раза по сравнению с контролем. Получен рекомбинантный штамм клеток E.coli, экспрессирующий ГАФДс, в которой N-концевой домен заменен на хитин-связывающий домен. Из данного штамма выделен гомогенный препарат рекомбинантной ГАФДс с удельной активностью 50 ед/мг. С целью получения поликлональных антител к ГАФДс была проведена иммунизация кролика очищенным препаратом ГАФДс. Исследованы некоторые свойства рекомбинантной ГАФДс. Методом динамического светорассеяния показано, что средний диаметр молекулы составляет 9 нм, что соответствует размерам тетрамера. Показано, что ГАФД и ГАФДс обладают приблизительно одинаковой чувствительностью к окислению перекисью водорода. Показано, что ГАФДс характеризуется более высокой термостабильностью по сравнению с ГАФД из мышц кролика.
# | Сроки | Название |
1 | 26 апреля 2006 г.-15 декабря 2008 г. | Роль энергетического обмена сперматозоидов в регуляции их подвижности |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".