|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
ВЛИЯНИЕ ЖЕЛАТИНЫ НА СВОЙСТВА ЛЮЦИФЕРАЗЫ СВЕТЛЯКОВ Luciola mingrelicaстатья
- Авторы: Ломакина Г.Ю., Безруких А.Е., Угарова Н.Н.
- Журнал: Вестник Московского университета
- Том: 2
- Номер: 53
- Год издания: 2012
- Издательство: Ред. журн.
- Местоположение издательства: М.
- Первая страница: 12
- Последняя страница: 17
- Аннотация: АТФ-реагент, содержащий мутантную термостабильную люциферазу светляков Luciola mingrelica, люциферин, MgSO4, компоненты буферного раствора и стабилизаторы, широко используется для определения нано- и пикомолярных концентраций аденозин-5’-фосфата (АТФ) в различных биологических образцах. Целью данной работы была оценка активности, стабильности и аналитических характеристик АТФ-реагента в растворе в присутствии и в отсутствие 5 % желатины и в желатиновом геле. При концентрации желатины 5 % и температуре ≥ 30o мы имели раствор АТФ-реагента, а ниже 30o наблюдали гелеобразование. Растворы АТФ-реагента были изучены при 30o, а тонкие желатиновые пленки с АТФ-реагентом – при 22o. Добавки желатины несколько снижали активность и стабильность люциферазы. Чувствительность определения АТФ (выше 0.96) не зависела от присутствия желатины и агрегатного состояния дисперсной системы. Пределы обнаружения составляли 2∙10-12, 7∙10-13, 7∙10-14 М АТФ при использовании АТФ-реагента в желатиновых пленках и в растворе в присутствии 5% желатины и в ее отсутствие, соответственно. Показано, что хранение АТФ-реагента при 22о в желатиновом геле не только сохраняет ферментативную активность, но и защищает фермент от бактериального загрязнения, следствием чего является потеря активности люциферазы.
- Добавил в систему: Угарова Наталья Николаевна