|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИПМех РАН |
||
Повышение термостабильности люциферазы светляков Luciola mingrelica сайт-направленным мутагенезом неконсервативных остатков цистеина 62 и 146статья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Информация о цитировании статьи получена из
Scopus
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 4 февраля 2014 г.
- Авторы: Ломакина Г.Ю., Модестова Ю.А., Угарова Н.Н.
- Журнал: Вестник Московского университета. Серия 2: Химия
- Том: 49
- Номер: 2
- Год издания: 2008
- Издательство: Издательский дом МГУ
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 81
- Последняя страница: 86
- DOI: 10.3103/S002713140802003X
- Аннотация: Методом сайт-направленного мутагенеза получены мутантные формы люциферазы светляков L. mingrelica с единичными заменами Cys62Ser и Cys146Ser. Мутации не повлияли на каталитическую активность фермента и спектры флуоресценции. Определены константы скорости быстрой (k1) и медленной (k2) стадии термоинактивации для исходного и мутантных ферментов при 37°С в отсутствие и в присутствии 12 мМ дитиотреитола (ДТТ). Показано увеличение стабильности мутантных форм люциферазы в несколько раз по сравнению с исходным ферментом – в присутствии ДТТ константа k2 для исходного фермента снижается в три раза, а для мутантных форм константы k1 и k2 практически не изменяются. Сделан вывод о том, что остатки Cys62 и Cys146 играют заметную роль в процессе инактивации люциферазы и их замены на Ser приводят к стабилизации фермента.
- Добавил в систему: Ломакина Галина Юрьевна